Anticuerpo monoclonal de conejo anti-EIF2AK1 para WB, ELISA - Q9BQI3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de EIF2AK1

• EIF2AK1, también conocida como inhibidor regulado por hemo (HRI) o represor controlado por hemo (HCR), es una serina/treonina quinasa que detecta el estrés metabólico y fosforila la subunidad α del factor de iniciación de la traducción eucariota 2 (eIF-2α) en la serina 51. Esta fosforilación convierte eIF-2α en un inhibidor global de la síntesis de proteínas, atenuando así la traducción dependiente de cap e iniciando la respuesta integrada al estrés (ISR).
  Referencias relacionadas: PMID:32132706, PMID:32132707, PMID:37327776

• Como sensor del hemo, EIF2AK1 se une a la hemina mediante la coordinación de un tiolato de cisteína y un nitrógeno de histidina con afinidad moderada, manteniendo la quinasa inactiva en condiciones normales. La disminución del hemo, como ocurre durante la deficiencia de hierro, libera esta inhibición, activa la ISR y desempeña un papel crucial en la coordinación de la síntesis de hemoglobina en los glóbulos rojos.

• Ante una disfunción mitocondrial, la forma procesada de DELE1 (S-DELE1) se une directamente a EIF2AK1 y la activa, lo que conduce a una reprogramación transcripcional mediada por ATF4. Esta vía también promueve la mitofagia independiente de PRKN mediante la fosforilación de eIF-2α en las mitocondrias dañadas.
  Referencias relacionadas: PMID:32132706, PMID:32132707, PMID:37327776, PMID:38340717

• El gen EIF2AK1 experimenta un corte y empalme alternativo, generando múltiples isoformas proteicas. La proteína se modifica postraduccionalmente mediante fosforilación y conjugación similar a la ubiquitina, como indican los estudios fosfoproteómicos y proteómicos.

• La localización subcelular no se describe explícitamente en el registro actual de UniProt; sin embargo, todos los sustratos y socios funcionales conocidos se localizan en el citoplasma, en consonancia con su función en la regulación de la traducción.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Dado que el inmunógeno corresponde a los residuos 337-586 de EIF2AK1 humano, que abarcan una gran parte del dominio quinasa, es probable que este anticuerpo reconozca tanto las isoformas de longitud completa como las truncadas que conservan esta región. Para Western blot (WB), considere optimizar la preparación de lisados con inhibidores de fosfatasas y validar la detección en líneas celulares con expresión confirmada de EIF2AK1.
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o de detección; combinarlo con un clon diferente o con un anticuerpo policlonal de detección puede mejorar la sensibilidad del ensayo. Valide el ensayo en la matriz de muestra correspondiente.
• Dada la designación [Validado por KD], el anticuerpo se ha probado en muestras sometidas a silenciamiento génico; realizar un WB comparativo con células tratadas con siRNA frente a células no tratadas puede confirmar aún más la especificidad en su sistema.

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