Anticuerpo Monoclonal Anti-eIF2C3 para WB, IHC-P, ELISA - Q9H9G7

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de eIF2C3/Argonaute-3

• eIF2C3, también conocido como Argonaute-3 (Ago3) o factor de iniciación de la traducción eucariota 2C 3, es un componente central del complejo silenciador inducido por ARN (RISC) involucrado en el silenciamiento génico postranscripcional.
• Se une a ARN cortos como los miRNAs y reprime la traducción de ARNm complementarios. En células madre, se ha propuesto que estabiliza siRNAs derivados de repeticiones Alu y facilita la degradación de un subconjunto de ARNm codificantes reclutando el complejo de descapado de ARNm a través de EDC4.
• eIF2C3 posee actividad de corte de ARN (endonucleolítica) pero es altamente selectiva, escindiendo solo ARN con secuencias flanqueantes 5' y 3' específicas en relación con la región de complementariedad guía-diana (PubMed:29040713). Referencias relacionadas: PMID:29040713
• La proteína se localiza en el citoplasma y se concentra en cuerpos P, gránulos citoplasmáticos involucrados en el almacenamiento y degradación de ARNm.
• eIF2C3 sufre modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación, fosforilación y conjugación tipo ubiquitina, lo que puede regular su estabilidad y actividad.
• El gen AGO3 sufre un empalme alternativo, produciendo múltiples isoformas que pueden tener funciones o patrones de expresión distintos.
• Se clasifica bajo varias palabras clave funcionales: es una proteína de unión a ARN, endonucleasa, hidrolasa, proteína de unión a metales y ribonucleoproteína, lo que subraya sus funciones catalíticas y estructurales en el silenciamiento de ARN.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aminoácidos 721-860) del eIF2C3 humano, que es parte del dominio PIWI; este dominio es crítico para la actividad endonucleasa y la unión del ARN guía. Los investigadores deben confirmar que el epítopo sea accesible bajo sus condiciones experimentales.
• Para el Western blot (WB), espere una banda de aproximadamente 97 kDa. Optimice la preparación de la muestra con condiciones de lisis y reducción apropiadas, e incluya controles tanto positivos (p. ej., HeLa) como negativos (p. ej., knockout) para verificar la especificidad.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), considere métodos estándar de recuperación de antígeno (p. ej., tampón citrato, pH 6.0) y valide la tinción comparando con los patrones de expresión conocidos de eIF2C3 o utilizando secciones de tejido tratadas con siRNA.
• En aplicaciones de ELISA, asegure una unión adecuada de la proteína o péptido recombinante y pruebe en un rango de concentraciones de anticuerpo para determinar la sensibilidad y especificidad óptimas.

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