Anticuerpo policlonal anti-eIF3B para WB, IF/ICC, ELISA - P55884

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de eIF3B

• eIF3B es una subunidad central del complejo del factor eucariota de iniciación de la traducción 3 (eIF-3), esencial para varias etapas del inicio de la síntesis de proteínas, incluida la formación del complejo de preiniciación 43S, el reclutamiento y escaneo del ARNm, así como el desensamblaje y reciclaje de los complejos ribosómicos posteriores a la terminación. Referencias relacionadas: PMID:17581632 PMID:25849773 PMID:27462815 PMID:9388245
• El complejo eIF-3 se dirige específicamente a un subconjunto de ARNm implicados en la proliferación, diferenciación y apoptosis celular, y regula su traducción mediante distintos modos de unión a estructuras de tallo-bucle del ARN para activar o reprimir la traducción. Referencias relacionadas: PMID:25849773
• eIF3B es una proteína de unión al ARN que contribuye al reclutamiento de los factores de iniciación (eIF-1, -1A, -2:GTP:Met-tRNAi, -5) a la subunidad ribosómica 40S, facilitando la formación del complejo de preiniciación 43S. Referencias relacionadas: PMID:17581632 PMID:25849773 PMID:27462815
• A nivel subcelular, eIF3B se encuentra en el citoplasma y puede localizarse en gránulos de estrés, lo que sugiere funciones en el control de la traducción en condiciones de estrés.
• En el contexto de una infección microbiana, eIF3B desempeña un papel en la traducción del calicivirus felino (FCV) al participar en un evento ribosómico de terminación-reiniciación que conduce a la síntesis de la proteína VP2. Referencias relacionadas: PMID:18056426
• Las modificaciones postraduccionales de eIF3B incluyen la acetilación y la fosforilación, que pueden regular su función o el ensamblaje del complejo.
• La proteína se caracteriza por la presencia de repeticiones WD, implicadas en las interacciones proteína-proteína, y experimenta corte y empalme alternativo, produciendo distintas isoformas.
• eIF3B también se conoce como homólogo de PRT1, eIF3S9, eIF-3-eta, eIF3 p110 y eIF3 p116. El peso molecular calculado es de aproximadamente 92,5 kDa, pero migra alrededor de 93 kDa mediante SDS-PAGE.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blot, se espera una banda de aproximadamente 93 kDa. Considere utilizar lisados celulares completos o extractos citoplasmáticos de muestras humanas, de ratón o de rata, e incluya controles positivos y negativos adecuados para confirmar la especificidad.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), asegúrese de realizar una fijación y permeabilización celular adecuadas. La tinción es predominantemente citoplasmática; en condiciones de estrés, eIF3B puede localizarse en gránulos de estrés, por lo que puede considerar inducir estrés para observar la formación de gránulos.
• Para aplicaciones de ELISA, la naturaleza policlonal y el reconocimiento de múltiples epítopos pueden mejorar la sensibilidad, pero la variabilidad entre lotes debe controlarse mediante la estandarización.
• Dado que se trata de un anticuerpo policlonal de conejo generado contra eIF3B humano, se recomienda validar la diana endógena en el sistema de muestras previsto, especialmente al cambiar entre especies (humano, ratón y rata).
• Aunque no figura entre las aplicaciones estándar, el anticuerpo puede ser adecuado para la inmunoprecipitación del complejo eIF-3; sin embargo, esto debe comprobarse empíricamente.

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