Anticuerpo policlonal de conejo anti-eIF4A para WB, IF/ICC, ELISA - P60842 / Q14240 / P38919

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de eIF4A

• eIF4A-1 (P60842), también conocido como DDX2A, es una helicasa de ARN dependiente de ATP y una subunidad central del complejo de iniciación de la traducción eIF4F.
• Como parte de eIF4F, eIF4A-1 participa en la iniciación de la traducción dependiente de la caperuza al desenrollar las estructuras secundarias del ARN en la 5'-UTR de los ARNm, lo que permite la unión del ribosoma y el escaneo en busca del codón de inicio.
  Referencias relacionadas: PMID:20156963
• Esta actividad helicasa es esencial para una síntesis eficiente de proteínas y contribuye a la proliferación y el crecimiento celular.
• La familia eIF4A está compuesta por tres miembros altamente homólogos: eIF4A-1 (P60842), eIF4A-2 (Q14240) y eIF4A-3 (P38919), todos ellos con dominios de helicasa DEAD-box conservados.
• La localización subcelular incluye el citoplasma, la región perinuclear, la membrana celular y los gránulos de estrés, donde es reclutada en condiciones de estrés celular.
• Las modificaciones postraduccionales, como la acetilación, la fosforilación y la ubiquitinación, regulan su actividad y estabilidad.
• eIF4A-1 también está implicado en las interacciones entre el hospedador y los virus, desempeñando funciones en la replicación de ciertos virus.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que cubre la región N-terminal (aa 1-100) de eIF4A-1 humano. El anticuerpo policlonal resultante puede reconocer varios miembros de la familia eIF4A debido a la alta conservación de la secuencia; considere verificar la especificidad para su isoforma objetivo en el lisado celular o tisular correspondiente.
• Para Western blot, se espera una banda predominante de aproximadamente 46 kDa para eIF4A-1, con posibles bandas adicionales correspondientes a eIF4A-2 (aprox. 46 kDa) y eIF4A-3 (aprox. 48 kDa). Utilice controles positivos y negativos adecuados.
• En inmunofluorescencia/ICC, la tinción puede observarse en el citoplasma y el núcleo, con posible enriquecimiento en la región perinuclear o en los gránulos de estrés bajo condiciones de estrés. El pretratamiento de las células para inducir la formación de gránulos de estrés (por ejemplo, con arsenito) puede utilizarse para estudios de localización.
• Para ELISA, el anticuerpo es adecuado como reactivo de captura o detección en formatos tipo sándwich; la reactividad cruzada con otras proteínas de la familia eIF4A debe evaluarse empíricamente.
• Como anticuerpo policlonal, debe validarse la consistencia del rendimiento entre lotes; considere emplear estándares de referencia internos para los ensayos cuantitativos.

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