Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-eIF4A3 para WB, IF/ICC, ELISA - P38919

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de eIF4A3

• Codificado por el gen EIF4A3, la proteína también se conoce como helicasa de ARN dependiente de ATP DDX48, proteína 265 de la matriz nuclear (NMP265) y factor de iniciación eucariota 4A-III.
• Es un componente integral del espliceosoma, esencial para el empalme de pre-ARNm. Referencias relacionadas: PMID:11911991638, PMID:22961380, PMID:28076346
• Actúa como una helicasa de ARN dependiente de ATP, facilitando el desenrollamiento dependiente de ATP de estructuras secundarias de ARN durante el empalme de pre-ARNm y otros procesos. Referencias relacionadas: PMID:16170325
• Es un componente central del complejo de unión de exones (EJC), depositado en el ARNm en las uniones de empalme para marcar los límites exón-exón e influir en los procesos posteriores al empalme, como la exportación nuclear, la localización subcelular, la eficiencia de traducción y la degradación de ARNm mediada por codones de terminación (NMD). Referencias relacionadas: PMID:16170325, PMID:16209946, PMID:16314458
• La actividad de helicasa es estimulada por CASC3 e inhibida por el heterodímero MAGOH-RBM8A, que estabiliza el EJC en el ARNm empalmado en una conformación unida a ATP.
• Modula el empalme alternativo de genes apoptóticos como BCL2L1, inhibiendo la producción de la isoforma proapoptótica Bcl-X(S). Referencias relacionadas: PMID:22203037
• Está involucrado en el desarrollo craneofacial. Referencias relacionadas: PMID:24360810
• A nivel subcelular, se localiza en el núcleo, las manchas del nucleoplasma y el citoplasma. Se expresa de forma ubicua y está sujeta a modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, fosforilación y ubiquitinación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 34–125 del eIF4A3 humano; por lo tanto, el anticuerpo probablemente reconoce un epítopo conservado en el extremo N-terminal. Considere verificar la especificidad con proteína recombinante o lisados de células que sobreexpresan eIF4A3.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de ~47 kDa. Utilice lisados de células enteras de líneas celulares humanas (HeLa, HEK293), de ratón o de rata como controles positivos. Valide en su sistema de muestras específico.
• En inmunofluorescencia/ICC, anticipe una tinción nuclear (con patrón punteado) y posiblemente citoplasmática. Los estudios de colocalización con marcadores del espliceosoma o del EJC pueden confirmar la especificidad del objetivo.
• Para ELISA, el anticuerpo puede utilizarse con el inmunógeno o la proteína eIF4A3 purificada. Establezca empíricamente las condiciones óptimas de recubrimiento y detección.

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