Anticuerpo policlonal anti-eIF4E para WB, IF/ICC, ELISA - P06730

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de eIF4E

• El factor de iniciación de la traducción eucariota 4E (eIF4E) también se conoce como subunidad de 25 kDa de eIF-4F o proteína de unión al capuchón del ARNm, codificada por el gen EIF4E. Es un regulador central de la síntesis de proteínas.
• Reconoce y se une al capuchón de 7-metilguanosina (m7G) en el extremo 5' de los ARNm como componente central del complejo eIF4F, facilitando el desenrollamiento de las estructuras secundarias del ARNm y el reclutamiento del ribosoma para la iniciación de la traducción. Referencias relacionadas: PMID:16271312 PMID:22578813
• Medía la exportación nuclear de un subconjunto de ARNm, incluidos ciclina D1 (CCND1), NOS2 y MDM2, mediante el reconocimiento del elemento 4ESE y el ensamblaje de un complejo de transporte que involucra a LRPPRC y XPO1. Referencias relacionadas: PMID:23471078 PMID:22684010
• Funciona en la represión traduccional como parte del complejo CYFIP1-EIF4E-FMR1 y participa en el almacenamiento de ARNm traduccionalmente inactivos en cuerpos de procesamiento citoplasmáticos (cuerpos P). Referencias relacionadas: PMID:24335285
• Desempeña funciones no canónicas en el núcleo, promoviendo la metilación del capuchón, el empalme (splicing) de pre-ARNm y el procesamiento del extremo 3', en parte facilitando la exportación y traducción de ARN que codifican factores de "capping" y escisión. Referencias relacionadas: PMID:11606200 PMID:22578813 PMID:22684010
• Sujeto a modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación y acetilación, que modulan su actividad; ha sido implicado en la espermatogénesis y en la señalización antiapoptótica a través de la regulación del transporte y la traducción de ARNm específicos.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la proteína eIF4E humana de longitud completa (aminoácidos 1–217). Se espera que este anticuerpo detecte eIF4E endógena a aproximadamente 25 kDa en muestras humanas.
• Para Western blot (WB), considere utilizar lisados de células completas de HeLa, HEK293 o Jurkat como controles positivos. Un rango de dilución de 1:500–1:2000 es común para anticuerpos policlonales, pero se recomienda la optimización.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), eIF4E se localiza principalmente en el citoplasma, siendo posible la tinción nuclear y en cuerpos P dependiendo del tipo celular y las condiciones; valide los patrones de tinción en su sistema específico.
• Para aplicaciones de ELISA, este anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o detección; titule para determinar la concentración de trabajo óptima para su formato de ensayo.

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