Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-eIF4E [Validado por KD] para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P06730

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de eIF4E

• El factor de iniciación de la traducción eucariota 4E (eIF4E), también conocido como eIF4E1, subunidad de 25 kDa de eIF-4F o proteína de unión al capuchón de mRNA, está codificado por el gen EIF4E (ID de Gen: 1977). Cumple una doble función en el citoplasma para la iniciación de la traducción y en el núcleo para la exportación de mRNA (PubMed:11606200, PubMed:22578813, PubMed:22684010).
  Referencias relacionadas:
  PMID:11606200, PMID:22578813, PMID:22684010

• eIF4E reconoce y se une específicamente al capuchón 7-metilguanosina (m7G) en el extremo 5' de los mRNA, un paso crítico que facilita el reclutamiento del ribosoma y el desenrollamiento de las estructuras secundarias del mRNA (PubMed:16271312, PubMed:22578813). Junto con EIF4G1, permite la traducción dependiente del elemento TISU, eludiendo la necesidad de escaneo ribosomal (PubMed:29987188).
  Referencias relacionadas:
  PMID:16271312, PMID:22578813, PMID:29987188

• Más allá de la iniciación, eIF4E regula la estabilidad y el almacenamiento del mRNA citoplasmático. En los cuerpos P (P-bodies), participa en un complejo que secuestra los mRNA reprimidos traduccionalmente, evitando su degradación (PubMed:24335285).
  Referencias relacionadas:
  PMID:24335285

• eIF4E facilita la exportación nuclear de un subconjunto de mRNA, incluidos NOS2/iNOS y MDM2, a través de interacciones con el elemento 4ESE y la vía de exportación LRPPRC–XPO1, influyendo así en procesos como la apoptosis y la progresión del ciclo celular (PubMed:23471078, PubMed:22684010).
  Referencias relacionadas:
  PMID:23471078, PMID:22684071

• A nivel subcelular, eIF4E se localiza en el citoplasma, cuerpos P, gránulos de estrés, así como en el núcleo (incluidas las motas nucleares y los cuerpos nucleares), reflejando sus múltiples funciones.

• eIF4E está sujeto a fosforilación (p. ej., en Ser209), que modula su afinidad de unión al capuchón y su actividad de traducción. También se ha informado de acetilación, y la proteína sufre splicing alternativo, dando lugar a isoformas con masas moleculares alrededor de 25–29 kDa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno, un péptido sintético que abarca los residuos 1–100 del eIF4E humano (NP_001959.1), se dirige a la región N‑terminal conservada. Basándose en la homología de secuencia, se anticipa reactividad cruzada con ortólogos de ratón, rata y mono, según lo confirmado por el proveedor.
• En western blot (WB), espere bandas correspondientes a las isoformas de 25 kDa, 27 kDa y 29 kDa; los controles de carga y las condiciones de bloqueo deben optimizarse para el tipo de muestra.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), eIF4E suele mostrar una señal citoplasmática difusa con tinción nuclear puntiforme; es posible que los protocolos de fijación y permeabilización necesiten ajustes dependiendo de la línea celular.
• Este anticuerpo está validado para inmunoprecipitación (IP) y ELISA; para ensayos cuantitativos, incluya los controles positivos y negativos apropiados.
• Debido a que eIF4E participa en múltiples complejos, la IP nativa puede coprecipitar socios de interacción; se pueden utilizar condiciones de lisis desnaturalizantes para aislar el eIF4E total.

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