Anticuerpo monoclonal de conejo anti-eIF4EBP1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q13541

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de eIF4EBP1

• eIF4EBP1 es un represor de la iniciación de la traducción que compite con eIF4G1/eIF4G3 por la unión a eIF4E, la proteína de unión a la capa del mRNA. La forma hipofosforilada de eIF4EBP1 se une fuertemente a eIF4E, impidiendo su incorporación al complejo eIF4F e inhibiendo la traducción dependiente de capa.
• La hiperfosforilación de eIF4EBP1 en respuesta a estímulos como factores de crecimiento y hormonas provoca su disociación de eIF4E, permitiendo el ensamblaje de eIF4F y la iniciación de la traducción. Esta regulación involucra las vías de señalización MAP quinasa y mTORC1.
• También conocido como PHAS-I (proteína fosforilada estable al calor y al ácido regulada por insulina 1), eIF4EBP1 es un mediador clave que conecta las señales extracelulares con el control de la síntesis de proteínas.
• La proteína se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, lo que coincide con su función en la regulación de la traducción y posiblemente otras funciones nucleares.
• eIF4EBP1 sufre múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación y ubiquitinación, que ajustan de forma precisa su actividad y estabilidad.
• Como miembro de la familia de proteínas de unión a eIF4E, eIF4EBP1 comparte similitudes estructurales y funcionales con otras 4E-BP, pero presenta características reguladoras distintas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-100) de eIF4EBP1 humano; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer preferentemente fragmentos de longitud completa y N-terminales. Considere la recuperación de antígeno o condiciones desnaturalizantes para una exposición óptima si busca epitopos internos en muestras fijadas.
• Para Western blot, eIF4EBP1 tiene un peso molecular predicho de ~13 kDa, pero las modificaciones postraduccionales (por ejemplo, la fosforilación) pueden generar múltiples bandas o desplazamientos. Valide en el sistema de muestra correspondiente e incluya inhibidores de fosfatadas si el estado de fosforilación es crítico.
• Para inmunofluorescencia/ICC, realice una fijación y permeabilización adecuadas para acceder a las fracciones citoplasmáticas y nucleares. Incluya controles para confirmar la especificidad.
• Para ELISA, combínelo con un anticuerpo de captura o detección adecuado para construir un ensayo sándwich, teniendo en cuenta la región de epitopo lineal que reconoce.

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