Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-eIF4EBP1 para IHC-P y ELISA - Q13541

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de eIF4EBP1

• La proteína de unión al factor 4E de iniciación de la traducción eucariota 1 (eIF4EBP1), también conocida como PHAS-I, es un represor clave de la iniciación de la traducción dependiente de la caperuza. Funciona uniéndose a la subunidad eIF4E e impidiendo su ensamblaje en el complejo eIF4F.
• La eIF4EBP1 hipofosforilada compite con la proteína andamio eIF4G por un sitio de unión compartido en eIF4E, inhibiendo así la traducción. La hiperfosforilación en respuesta a factores de crecimiento, hormonas o nutrientes disocia eIF4EBP1 de eIF4E, permitiendo la formación del complejo eIF4F y la iniciación de la traducción.
• La actividad de eIF4EBP1 se regula principalmente a través de las vías de señalización mTORC1 y MAP quinasa, integrando señales extracelulares e intracelulares para controlar la síntesis de proteínas.
• eIF4EBP1 se localiza predominantemente en el citoplasma, pero también puede detectarse en el núcleo, lo cual es consistente con sus funciones en la regulación de la traducción y posiblemente en la exportación de eIF4E.
• Las modificaciones postraduccionales, particularmente la fosforilación en múltiples sitios, la acetilación y la ubiquitinación, modulan dinámicamente su afinidad por eIF4E y sus funciones regulatorias.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno se diseñó contra la región N-terminal (aminoácidos 1-118) de eIF4EBP1 humano, que cubre una región crítica para la unión a eIF4E y la regulación dependiente de fosforilación. Esto sugiere que el anticuerpo puede reconocer tanto las formas fosforiladas como las no fosforiladas, pero se aconseja la validación en el sistema de muestra relevante.
• Para aplicaciones de IHC-P, considere condiciones de recuperación de antígeno adecuadas para antígenos nucleares y citoplasmáticos, e incluya controles de tejido apropiados (por ejemplo, tejidos con expresión conocida alta/baja de eIF4EBP1). La reactividad cruzada con ratón y rata indica una posible utilidad en estas especies.
• Para ELISA, utilice proteína eIF4EBP1 recombinante o lisados celulares como antígenos de recubrimiento, y pruebe las diluciones del anticuerpo en formato de tablero de ajedrez (checkerboard). Dado que el anticuerpo es un pAb policlonal de conejo, la señal puede variar entre lotes.
• Como anticuerpo policlonal, ofrece un reconocimiento amplio de epítopos, lo cual puede ser ventajoso para detectar múltiples isoformas o modificaciones, pero también puede requerir un bloqueo cuidadoso y la selección de anticuerpos secundarios para minimizar el fondo.

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