Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Endo G para WB, ELISA - Q14249

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de Endo G

• Endo G es una endonucleasa mitocondrial codificada por el gen ENDOG, localizada principalmente en la mitocondria (LOCALIZACIÓN SUBCELULAR: Mitocondria).
• Corta preferentemente el ADN bicatenario que contiene 5-hidroximetilcitosina (5hmC), mostrando una mayor eficiencia de corte y especificidad de sitio para los ADN modificados (PubMed:25355512). Referencias relacionadas: PMID:25355512
• Muestra una afinidad significativamente mayor por las uniones de Holliday de cuatro cadenas en comparación con los ADN bicatenarios y monocatenarios, lo que sugiere un papel en la recombinación del ADN (por similitud).
• Promueve la recombinación homóloga conservadora cuando los sustratos están modificados con 5hmC (PubMed:25355512). Referencias relacionadas: PMID:25355512
• Media la autofagia mediante la supresión de la vía mTOR a través de la interacción dependiente de la fosforilación con YWHAG y de la respuesta al daño del ADN inducida por su actividad endonucleasa (PubMed:33473107). Referencias relacionadas: PMID:33473107
• La fosforilación mediada por GSK3-beta aumenta la unión de Endo G a YWHAG, lo que libera TSC2 y PIK3C3 de YWHAG, provocando la supresión de mTOR y el inicio de la autofagia (PubMed:33473107). Referencias relacionadas: PMID:33473107
• Corta el ADN mitocondrial (ADNmt) en respuesta al estrés oxidativo y nitrosativo, induciendo así la replicación compensatoria del ADNmt (PubMed:29719607). Referencias relacionadas: PMID:29719607
• La proteína contiene enlaces disulfuro y está regulada postraduccionalmente mediante fosforilación (Palabras clave: Enlace disulfuro, Fosfoproteína).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido sintético que abarca los aminoácidos 198–297 de la Endo G humana. Los investigadores pueden considerar la asignación de esta región a dominios funcionales o estructurales conocidos para predecir la accesibilidad del epítopo.
• Para aplicaciones de Western blot, Endo G migra aproximadamente a 33 kDa. Incluya controles positivos adecuados (por ejemplo, fracciones mitocondriales de células humanas, de ratón o de rata) y valide la detección en su tipo de muestra específico.
• Debido a su localización mitocondrial, la extracción eficiente de proteínas puede requerir kits de aislamiento mitocondrial o tampones de lisis optimizados para proteínas de orgánulos.
• En ELISA, puede considerarse la combinación con un anticuerpo de captura/detección adecuado; confirme la linealidad y la sensibilidad utilizando Endo G recombinante o lisados celulares.
• Se ha informado reactividad cruzada para especies humana, de ratón y de rata. Valide la especificidad en cada especie, especialmente si la homología de secuencia en la región del inmunógeno varía.

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