Anticuerpo Monoclonal Anti-eNOS para WB, IHC-P, ELISA - P29474

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de eNOS

• eNOS (NOS3) genera óxido nítrico (NO), una molécula de señalización gaseosa que relaja el músculo liso vascular a través de cGMP. Referencias relacionadas: PMID:1378832
• El NO producido por eNOS también impulsa la angiogénesis coronaria inducida por VEGF y facilita la coagulación mediada por plaquetas.
• El gen NOS3 produce dos isoformas; la isoforma 2 carece de actividad catalítica y actúa como regulador dominante negativo al heterodimerizarse con la isoforma 1.
• eNOS se localiza principalmente en las caveolas de la membrana plasmática, pero también se asocia con el aparato de Golgi, el citoesqueleto y el citoplasma.
• Se expresa en plaquetas, placenta, hígado y riñón.
• eNOS es una enzima multidominio que requiere FAD, FMN, NADPH, hemo, calcio y calmodulina para su actividad, y está regulada por miristoilación, palmitoilación y fosforilación.
• Pertenece a la familia de las óxido nítrico sintasas; su peso molecular es de aproximadamente 133 kDa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno comprende el segmento C-terminal (aa 1035–1110) de eNOS humano, que puede distinguir la isoforma activa de longitud completa de las variantes truncadas; confirma la especificidad mediante ensayos específicos de isoforma.
• Para transferencia Western, se espera una banda de ~133 kDa; incluye lisados endoteliales (por ejemplo, HUVEC) como control positivo y utiliza condiciones reductoras adecuadas.
• En el análisis inmunohistoquímico (parafina), se recomienda la recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón de citrato, pH 6.0) y tejidos con alta expresión endógena de eNOS (por ejemplo, placenta, riñón) como pasos iniciales de validación.
• El rendimiento de ELISA depende del formato de recubrimiento y el sistema de detección; la reactividad cruzada con eNOS de rata y ratón permite flexibilidad en ensayos adaptados a cada especie.

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