Anticuerpo Policlonal Anti-EP300 para IHC-P, ELISA - Q09472

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona Acetiltransferasa p300

• La histona acetiltransferasa p300 (también conocida como proteína p300 asociada a E1A, KAT3B) es un coactivador transcripcional grande de ~264 kDa codificado por el gen EP300. Pertenece a la familia de acetiltransferasas p300/CBP que regulan la estructura de la cromatina y la expresión génica.
• p300 funciona como una histona acetiltransferasa, acetilando las cuatro histonas centrales en los nucleosomas (H2A, H2B, H3, H4). Esta acetilación de histonas sirve como una marca epigenética para la activación transcripcional, y también puede generar marcas duales de acetilación-metilación (Kacme) en las histonas H3 y H4, asociadas con la cromatina activa. Referencias relacionadas: PMID:23415232 PMID:23934153 PMID:8945521 PMID:21131905 PMID:23911289 PMID:37731000
• Más allá de las histonas, p300 acetila numerosas proteínas no histónicas, incluyendo factores de transcripción (p. ej., p53/TP53, ALX1, FOXO1, STAT3) y otros reguladores (p. ej., HDAC1, SIRT2), modulando así su estabilidad, unión al ADN o actividad enzimática. También participa en la respuesta al daño del ADN acetilando la histona H1 y PCNA. Referencias relacionadas: PMID:11511361 PMID:15448695 PMID:15653507 PMID:12929931 PMID:18722353
• p300 exhibe una actividad aciltransferasa versátil, utilizando varios sustratos acil-CoA para catalizar la crotonilación, butirilación, 2-hidroxisobutirilación, lactilación, propionilación e isonicotinilación de histonas, vinculando el metabolismo con el estado de la cromatina. Referencias relacionadas: PMID:17267393 PMID:25818647 PMID:29775581 PMID:31645732
• La localización subcelular incluye el núcleo, el citoplasma y los cromosomas. La p300 nuclear es reclutada a los promotores por factores de transcripción específicos y está implicada en la regulación del ritmo circadiano a través de interacciones con CLOCK/BMAL1. Referencias relacionadas: PMID:14645221
• p300 es un sustrato para diversas modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, fosforilación, metilación, citrulinación y ubiquitinación, las cuales ajustan finamente su actividad e interacciones. Su dominio bromo reconoce lisinas acetiladas y la proteína contiene motivos de dedo de zinc.
• En la patogénesis viral, p300 es secuestrada por la proteína Tat del VIH-1 para facilitar la transcripción proviral, e interactúa con E1A del adenovirus, vinculándola con la transformación celular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es una proteína recombinante que abarca los aminoácidos 940-1030, una región que puede cubrir parte del dominio catalítico HAT u otras regiones funcionales; este diseño puede ser adecuado para detectar la p300 de longitud completa y posiblemente distinguirla del CBP altamente homólogo. Verifique la especificidad utilizando modelos de knockout o knockdown.
• Las aplicaciones recomendadas por el proveedor son IHC-P y ELISA. Para inmunohistoquímica, considere las condiciones de recuperación de antígenos y optimice la concentración del anticuerpo para los patrones de tinción nuclear y citoplasmática. Para ELISA, valide con proteína p300 recombinante como estándar.
• Debido a su gran tamaño (264 kDa), utilice una electroforesis en gel apropiada (p. ej., SDS-PAGE al 6-8%) y tiempos de transferencia prolongados para el western blot si se intenta.
• Reacciona de forma cruzada con la p300 de ratón y rata según los datos del proveedor, lo que permite su uso en modelos de roedores. Sin embargo, confirme la reactividad con su línea celular o tejido específico.

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