Anticuerpo policlonal anti-EPHA3/EPHA4/EPHA5 para IHC-P, IF/ICC y ELISA - P29320 / P54764 / P54756

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de EPHA3/EPHA4/EPHA5

• EPHA3 (receptor 3 de efrina tipo A) es una tirosina cinasa receptora que pertenece a la subfamilia de receptores de efrinas. También se conoce como EK4, HEK, TYRO4 y ETK1. El anticuerpo reconoce EPHA3, así como los receptores estrechamente relacionados EPHA4 y EPHA5, debido a la conservación de epítopos en la región C-terminal.
• Tras unirse a ligandos de efrina-A presentes en células adyacentes, EPHA3 media una señalización bidireccional: señalización directa a través de su dominio de cinasa intracelular y señalización inversa a través del ligando de efrina. Esta comunicación dependiente del contacto regula la adhesión célula-célula, la dinámica del citoesqueleto y la migración celular. Referencias relacionadas: PMID:11870224
• EPHA3 se une preferentemente a efrina-A5 (EFNA5), pero también interactúa con efrina-A1 (EFNA1). La activación por EFNA1 inhibe la transición epitelial-mesenquimal en células cardíacas, contribuyendo al desarrollo normal del corazón. Referencias relacionadas: PMID:12794130
• El receptor se localiza en la membrana celular y también puede encontrarse en formas secretadas. Es una proteína de membrana de tipo I de paso único, con un dominio extracelular de unión al ligando, una región rica en cisteína, dos repeticiones de fibronectina tipo III, un segmento transmembrana y un dominio intracelular de tirosina cinasa.
• EPHA3 se expresa ampliamente, con los niveles más altos observados en la placenta, y desempeña un papel en la organización retinotectal de las neuronas y en la segregación de los axones motores y sensoriales durante el desarrollo de los circuitos neuromusculares.
• Entre sus características estructurales clave se incluyen las actividades de unión al ATP y de transferasa, la N-glucosilación y la fosforilación. La proteína de longitud completa tiene un peso molecular calculado de aproximadamente 110 kDa.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo es un péptido sintético derivado de una región conservada (aminoácidos 700-800) compartida por EPHA3, EPHA4 y EPHA5 humanos. Este diseño probablemente contribuye a la reactividad cruzada demostrada con los ortólogos de ratón y rata.
• Para IHC-P, considere optimizar el método de recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo. La validación debe realizarse en muestras de tejido que se sepa que expresan miembros de la familia EPHA, como la placenta o tejidos neuronales.
• Para IF/ICC, pueden ser necesarios protocolos de permeabilización para detectar epítopos intracelulares. Incluya controles adecuados, como células con expresión confirmada de EPHA.
• En ELISA, el anticuerpo puede utilizarse para detectar proteínas EPHA3/4/5 recombinantes o nativas. Asegúrese de que el antígeno de recubrimiento y el sistema de detección sean compatibles con un anticuerpo policlonal de conejo.

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