Anticuerpo policlonal de conejo Anti-EPHA5 para WB, IF/ICC, ELISA - P54756

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EPHA5

• El receptor de efrina tipo A 5 (EPHA5), también conocido como EHK-1, EK7 o TYRO4, es un miembro de la subfamilia de receptores de efrina de las receptor tirosina quinasas que se unen a ligandos de efrina-A anclados a GPI, siendo EFNA5 probablemente su ligando afín principal.
• Tras la unión al ligando, EPHA5 media la señalización bidireccional dependiente de contacto: señalización directa a través del receptor y señalización inversa a través del ligando de efrina, organizando procesos de desarrollo críticos.
• EPHA5 funciona como molécula de guía de axones, esencial para la formación de las vías retinotectal, entorrino-hipocampal e hipocamposeptal durante el desarrollo del sistema nervioso.
• En el cerebro adulto, EPHA5 contribuye a la plasticidad sináptica regulando la sinaptogénesis, lo que resalta su papel más allá del desarrollo embrionario.
• Fuera del sistema nervioso, la interacción entre EPHA5 y EFNA5 media la comunicación entre las células de los islotes pancreáticos, regulando la secreción de insulina estimulada por glucosa (Por similitud).
• A nivel subcelular, EPHA5 se localiza en la membrana celular y se enriquece en proyecciones celulares como axones y dendritas, lo que coincide con su papel en la conectividad neuronal.
• La proteína se expresa casi exclusivamente en el sistema nervioso, sobre todo en neuronas corticales, células de Purkinje cerebelosas y neuronas piramidales, con un gradiente de expresión creciente desde el prosencéfalo hasta el romboencéfalo y la médula espinal.
• EPHA5 sufre splicing alternativo y modificaciones postraduccionales que incluyen glicosilación y fosforilación, características comunes de las receptor tirosina quinasas que modulan la actividad de señalización.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región N-terminal (aminoácidos 1-130) de EPHA5 humano, que incluye el péptido señal y parte del dominio de unión al ligando de efrina; este diseño puede proporcionar especificidad para la porción extracelular del receptor.
• Para Western blotting, el peso molecular predicho es de aproximadamente 115 kDa; debido a la glicosilación, la banda observada puede aparecer ligeramente por encima. Se recomienda utilizar lisados de control positivo de tejido cerebral o líneas celulares neuronales (por ejemplo, SH-SY5Y) que se sabe que expresan EPHA5.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), se espera que EPHA5 se localice en la membrana celular y dentro de proyecciones neuronales como axones y dendritas. Valide los patrones de tinción en neuronas primarias cultivadas o líneas celulares neuronales, e incluya controles apropiados para confirmar la especificidad.
• Las aplicaciones de ELISA se pueden utilizar para detectar EPHA5 en lisados celulares o homogenizados de tejido; sin embargo, se recomienda optimizar las condiciones de recubrimiento y detección según la matriz de muestra.
• Dada la reactividad cruzada con ratón y rata, este anticuerpo es adecuado para estudios en modelos de roedores, pero confirme los niveles de expresión en el tejido diana, ya que EPHA5 presenta gradientes específicos por región en el sistema nervioso.

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