Anticuerpo monoclonal de conejo anti-ERAP1 para WB, IHC-P, ELISA - Q9NZ08

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ERAP1

• ERAP1 (Aminopeptidasa 1 del retículo endoplásmico) es una enzima crítica en la inmunidad adaptativa, que recorta péptidos precursores antigénicos a longitudes óptimas (8-10 residuos) para su carga en moléculas de MHC de clase I.
• Exhibe una fuerte preferencia por la longitud del sustrato, procesando eficientemente péptidos de 9-16 aminoácidos, y típicamente deja de recortar después de generar un 9-mero.
• Hidroliza preferentemente leucina y péptidos con extremos C-terminales hidrofóbicos, mientras muestra una actividad débil hacia residuos terminales cargados, dando forma al inmunopeptidoma.
• Más allá del procesamiento de antígenos, ERAP1 inactiva la angiotensina II y genera bradiquinina, lo que sugiere un papel en la regulación de la presión arterial dentro del riñón.
• La proteína se localiza en la membrana del retículo endoplásmico, anclada por un péptido señal N-terminal y un dominio transmembrana.
• Se expresa de manera ubicua en todos los tejidos humanos, reflejando su papel de mantenimiento en el recambio de péptidos.
• Contiene características estructurales clave: dominio de metaloproteasa que une zinc, enlaces disulfuro, sitios de N-glicosilación; clasificado bajo proteasas, hidrolasas y proteínas relacionadas con la inmunidad.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (a.a. 842-941) se dirige a una región C-terminal; verifique que este epítopo sea accesible en su muestra objetivo en condiciones nativas y desnaturalizantes.
• Para Western blot, utilice condiciones reductoras y espere una banda a ~107 kDa; confirme la especificidad con lisados de knockdown o knockout.
• En IHC-parafina, pruebe métodos de recuperación de antígeno (inducidos por calor, pH 6 o pH 9) ya que ERAP1 es una proteína de membrana; utilice tinción de contraste para evaluar la morfología del tejido.
• Reacciona de forma cruzada con ERAP1 de ratón y rata, pero se debe verificar la homología de secuencia en la región del inmunógeno si se utilizan otras especies; valide en su sistema.
• El rendimiento de ELISA depende del formato de recubrimiento; considere usar el anticuerpo como captura o detección, y combínelo con un anticuerpo secundario compatible para ensayos tipo sándwich.

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