Anticuerpo policlonal de conejo anti-ERCC3 para WB, ELISA - P19447

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de ERCC3

• ERCC3 (XPB) es la subunidad de 89 kDa del complejo central del factor general de transcripción y reparación del ADN IIH (TFIIH), también conocida como subunidad de 89 kDa del factor de transcripción básico 2 (BTF2 p89).
• Funciona como una helicasa/translocasa de ADN dependiente de ATP con actividad 3'-5', que se une al ADN bicatenario y lo desenrolla mediante actividad translocasa en lugar de una acción helicasa clásica. Referencias relacionadas:
  PMID:27193682, PMID:33902107
• En el inicio de la transcripción, ERCC3 es esencial para la apertura del promotor y el escape del promotor; su actividad helicasa dependiente de ATP induce y propaga una torsión del ADN para abrir el promotor. Referencias relacionadas:
  PMID:10024882, PMID:8157004, PMID:27193682, PMID:33902107
• En la reparación por escisión de nucleótidos (NER), ERCC3 ayuda a abrir el ADN alrededor de las lesiones; la actividad ATPasa (pero no la actividad helicasa) es necesaria para la fusión inicial del ADN, mientras que XPA lo retiene en el extremo 5' de una burbuja de ADN. Referencias relacionadas:
  PMID:17466626, PMID:2111438, PMID:31253769
• ERCC3 se localiza exclusivamente en el núcleo.
• Participa en las interacciones entre el huésped y los virus, y cuando está mutado se relaciona con enfermedades como el xeroderma pigmentoso, el síndrome de Cockayne y la tricotiodistrofia.
• Entre sus modificaciones postraduccionales se incluye la fosforilación; es una fosfoproteína.
• La proteína tiene un peso molecular de 89.278 Da y participa en procesos celulares esenciales, incluida la regulación de la transcripción, la reparación del ADN y la respuesta al daño del ADN.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado corresponde a los aminoácidos 512–782 de ERCC3 humano (NP_000113.1); esta región puede generar anticuerpos que reconozcan tanto ERCC3 de longitud completa como posibles isoformas.
• Para la inmunotransferencia Western, considere utilizar extractos nucleares o lisados de células completas de líneas celulares humanas, de ratón o de rata; el tamaño de banda previsto es de aproximadamente 89 kDa.
• El ELISA puede utilizarse para cuantificar los niveles de ERCC3 o para realizar cribados, pero se deben optimizar las condiciones de recubrimiento y detección para el formato específico de su ensayo.
• Dado que ERCC3 es un componente del complejo TFIIH, los experimentos de coinmunoprecipitación pueden requerir una optimización cuidadosa para mantener la integridad del complejo.
• Al estudiar la reparación del ADN o la transcripción, valide el rendimiento del anticuerpo en su sistema de muestras relevante bajo condiciones inducidas o basales.

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