Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-ERCC8 para WB, ELISA - Q13216

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ERCC8

• ERCC8 (también conocido como CSA, CKN1, UVSS2) es una proteína de reparación por escisión de ADN y un componente de reconocimiento de sustratos del complejo CSA.
• El complejo CSA es un complejo ligasa de ubiquitina de proteínas E3 DCX (DDB1-CUL4-X-box) que funciona en la reparación de escisión de nucleótidos acoplada a la transcripción (TC-NER), eliminando rápidamente las lesiones que bloquean la ARN polimerasa II de la hebra transcrita de genes activos. Referencias relacionadas: PMID:12732143 PMID:16751180 PMID:16964240
• Al ser reclutado en la ARN polimerasa II detenida por lesiones, el complejo CSA media la ubiquitinación de la subunidad POLR2A/RPB1 de la Pol II en Lys-1268, un paso crítico que gobierna la estabilidad de la ARN Pol II e inicia la escisión del daño mediante el reclutamiento de TFIIH. Referencias relacionadas: PMID:12732143 PMID:16751180 PMID:16964240
• El complejo CSA también promueve la ubiquitinación y la degradación proteasómica de ERCC6/CSB de manera dependiente de los rayos UV, lo cual es esencial para la recuperación de la síntesis de ARN después de la reparación. Referencias relacionadas: PMID:16751180
• ERCC8 desempeña un papel en la reparación de roturas de doble hebra de ADN (DSB) mediante la unión de extremos no homólogos (NHEJ). Referencias relacionadas: PMID:29545921
• ERCC8 se localiza en el núcleo, específicamente en los cromosomas y la matriz nuclear.
• Como proteína de repetición WD, ERCC8 contiene múltiples dominios WD40, y sus mutaciones están asociadas con el síndrome de Cockayne, un trastorno caracterizado por enanismo, sordera y fotosensibilidad.
• ERCC8 sufre splicing alternativo y es una fosfoproteína, sujeta a modificaciones postraduccionales.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido sintético correspondiente a la región C-terminal (aa 300-396) de ERCC8 humano. Este diseño puede mejorar la especificidad hacia la proteína objetivo.
• Para Western blot (WB), valide el anticuerpo utilizando controles positivos y negativos apropiados. Detecte ERCC8 endógeno en lisados celulares humanos y de ratón al peso molecular predicho de 44 kDa.
• Para ELISA, optimice la concentración del antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo para lograr una sensibilidad adecuada. Combínelo con un sistema de detección compatible.
• Si se observa una señal débil o nula, considere probar diferentes tampones de bloqueo, tiempos de incubación del anticuerpo o métodos de preparación de lisados. La recuperación de epítopos inducida por calor generalmente no es necesaria para Western blot.

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