Anticuerpo Policlonico de Conejo Anti-ERK5 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13164

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ERK5

• ERK5 (también conocido como Big MAP kinase 1 (BMK-1) o MAPK7) es una serina/treonina proteína quinasa perteneciente a la familia de las quinasas MAP que desempeña un papel fundamental en la proliferación celular, diferenciación y supervivencia.
• Se activa específicamente por la quinasa corriente arriba MAP2K5 (MEK5), lo que desencadena su translocación al núcleo donde fosforila factores de transcripción como MEF2C.
• La estimulación con EGF activa ERK5 a través de una vía independiente de Ras y dependiente de MAP2K5, distinta de la cascada de señalización clásica de ERK1/2.
• En cardiomiocitos, ERK5 actúa como regulador negativo de la apoptosis al interactuar con STUB1/CHIP para promover la ubiquitinación y degradación de las isoformas proapoptóticas ICER de CREM.
• ERK5 contribuye a la función endotelial y la integridad de los vasos sanguíneos, y puede estar involucrado en la diferenciación de las células musculares.
• Fosforila SGK1 en la Ser-78, una modificación requerida para la progresión del ciclo celular inducida por factores de crecimiento.
• Subcelularmente, ERK5 se encuentra en el citoplasma y el núcleo, y se concentra en los cuerpos nucleares PML después de la activación.
• Se expresa en muchos tejidos adultos, con mayor abundancia en corazón, placenta, pulmón, riñón y músculo esquelético, pero no es detectable en hígado.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-310) de ERK5 humano, por lo que puede detectar tanto isoformas de longitud completa como isoformas truncadas en el extremo N. Se recomienda realizar la validación en el sistema de muestra correspondiente.
• Para Western blot, se debe esperar una banda cerca del peso molecular predicho de 88 kDa; considere usar lisados de control positivo adecuados (por ejemplo, HeLa, HEK293, o muestras de tejido con alta expresión de ERK5 como corazón o músculo esquelético).
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunocitoquímica (IF/ICC), puede ser necesario optimizar los pasos de recuperación de antígeno y permeabilización para acceder a las poblaciones de ERK5 nuclear. Use tejidos/células de control positivo y negativo para confirmar la especificidad de la tinción.
• Para ELISA, ya sea como anticuerpo de captura o detección, se debe evaluar la reactividad cruzada con otras quinasas MAP; se recomienda realizar pruebas contra ERK1, ERK2 o JNK recombinantes para confirmar la especificidad.
• Dada la reactividad cruzada reportada con ratón y rata, este anticuerpo es adecuado para estudios traslacionales en estas especies, pero se recomienda realizar una alineación de secuencias de la región del inmunógeno para confirmar la conservación del epítopo.

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