Anticuerpo policlonal de conejo anti-ERp29 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P30040

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ERp29

• ERp29, también conocido como ERp28, ERp31, PDIA9 y PDI-DB, es una proteína residente del retículo endoplásmico (RE) codificada por el gen ERP29 (C12orf8) en humanos.
• No presenta actividad disulfuro isomerasa, sino que desempeña un papel crítico en el procesamiento y plegamiento de proteínas secretoras dentro de la luz del RE.
• ERp29 se localiza principalmente en la luz del RE y también se ha detectado en melanosomas, lo que indica su participación en las vías secretoras y de pigmentación.
• La proteína se expresa de forma ubicua, con niveles más altos en tejidos secretorios, lo que coincide con su función propuesta en la secreción de proteínas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación, y el gen sufre splicing alternativo, generando múltiples variantes de transcritos.
• Estudios estructurales (palabra clave de estructura 3D en UniProt) han resuelto su organización de dominios, ayudando a comprender sus interacciones funcionales.
• El peso molecular predicho es de aproximadamente 29 kDa (UniProt: 28993 Da), que coincide con el peso de la proteína observado en entornos experimentales.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 33–261, cubriendo la proteína madura después de la eliminación del péptido señal; se espera que reconozca tanto a ERp29 nativo como desnaturalizado en aplicaciones como WB e IF/ICC.
• Para Western blot (WB), se anticipa una banda cerca de los 29 kDa; use tampones de lisis optimizados para proteínas luminales del RE e incluya inhibidores de proteasas/fosfatasas.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), la recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón de citrato inducido por calor) puede mejorar la tinción en tejidos incluidos en parafina FFPE; valide usando tejidos secretorios con expresión alta conocida de ERp29.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), la permeabilización es esencial para acceder a la luz del RE; la co-tinción con marcadores del RE (por ejemplo, calnexina) puede confirmar la especificidad de localización.
• Los ensayos basados en ELISA se pueden optimizar usando el inmunógeno recombinante como estándar de referencia; los pasos adecuados de bloqueo y lavado deben determinarse empíricamente.
• La reactividad cruzada reportada con ERp29 de ratón y rata (84% y 83% de identidad de secuencia, respectivamente) apoya los estudios entre especies; sin embargo, se recomienda la validación en el sistema de muestra correspondiente.

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