Anticuerpo policlonal anti-EXT2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q93063

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EXT2

• Codifica la exostosina-2, una glicosiltransferasa transmembrana de tipo II que actúa como una subunidad crítica de la co-polimerasa de heparán sulfato (HS); otros nombres incluyen Glucuronosil-N-acetilglucosaminil-proteoglicano 4-alfa-N-acetilglucosaminiltransferasa y proteína 2 de exostosis múltiple.
• Forma un complejo heterodimérico con EXT1 para constituir la polimerasa de HS activa; juntos catalizan la elongación procesiva del esqueleto de HS mediante la adición alternante de residuos de ácido D-glucurónico (GlcA) y N-acetil-D-glucosamina (GlcNAc) a partir de sus respectivos donantes de UDP-azúcar. Referencias relacionadas: PMID:22660413, PMID:36402845, PMID:36593275
• La subunidad EXT1 proporciona la actividad glucuronosiltransferasa, mientras que EXT2 es responsable de la actividad N-acetilglucosaminiltransferasa; ambas son necesarias para la función completa de la polimerasa y la síntesis de la cadena de HS. Referencias relacionadas: PMID:36402845, PMID:36593275
• Los proteoglicanos de heparán sulfato resultantes son componentes ubicuos de la matriz extracelular y de las superficies celulares, desempeñando papeles esenciales en la homeostasis tisular, la señalización de factores de crecimiento y la adhesión celular. Referencias relacionadas: PMID:19344451, PMID:22660413
• Se localiza principalmente en la membrana del aparato de Golgi, con presencia en la red cis-Golgi y en la membrana del retículo endoplásmico; también se ha reportado una forma secretada.
• Ampliamente expresado en todos los tejidos.
• Las mutaciones en EXT2 están asociadas con exostosis múltiples hereditarias, un trastorno autosómico dominante caracterizado por excrecencias óseas cubiertas de cartílago; la proteína también está clasificada como un supresor de tumores.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 80–340) abarca el dominio catalítico de EXT2; se espera que el anticuerpo policlonal resultante reconozca múltiples epítopos dentro de esta región, proporcionando una detección robusta para Western blotting desnaturalizante y aplicaciones nativas como IF/ICC.
• Para Western blotting, considere un rango de dilución del anticuerpo primario de 1:500–1:2000 y valídelo frente al peso molecular previsto de ~82 kDa; se recomienda la inclusión de controles adecuados (p. ej., lisados que sobreexpresan EXT2 o muestras tratadas con siRNA).
• En inmunofluorescencia/ICC, EXT2 suele mostrar un patrón de tinción perinuclear similar al del Golgi; la permeabilización de la membrana con Triton X-100 al 0,1% puede mejorar la accesibilidad mientras se preserva la morfología de los orgánulos.
• El rendimiento en ELISA está respaldado por el inmunógeno de proteína recombinante; considere usar el anticuerpo como reactivo de captura o detección en configuraciones de ELISA sándwich para la investigación de biomarcadores relacionados con HS.
• Se ha demostrado la reactividad cruzada con EXT2 de ratón y rata, lo que permite su uso en modelos de roedores; sin embargo, es aconsejable verificar la especificidad en la especie y el tejido pertinentes antes de realizar estudios a gran escala.

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