Anticuerpo Policlonico de Conejo Anti-Fas para WB, ELISA - P25445

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Fas

• Fas, también conocido como CD95, APO-1 y TNFRSF6, es un miembro de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral y un mediador crítico de la apoptosis.
• Funciona como receptor para FASLG (ligando de Fas), formando el complejo de señalización inductivo de muerte (DISC) mediante el reclutamiento de FADD, que activa la casasa-8 y la cascada de casasas aguas abajo para ejecutar la apoptosis.
• La isoforma 1 de longitud completa (unida a membrana) desencadena la apoptosis, mientras que las isoformas secretadas 2-6 producidas por empalme alternativo actúan como receptores señuelo que bloquean la apoptosis mediada por FASLG in vitro.
• Fas se localiza principalmente en la membrana celular, incluidas las balsas de membrana, pero las isoformas secretadas también se detectan en el espacio extracelular.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen glucosilación, palmitoilación y fosforilación, que regulan su tráfico membranal y su señalización.
• En células mononucleares de sangre periférica (PBMC) en reposo, la isoforma 1 y la isoforma 6 se expresan en niveles iguales; tras la activación, la isoforma 1 aumenta mientras que la isoforma 6 disminuye, lo que sugiere un cambio regulatorio.
• La apoptosis mediada por Fas es esencial para la tolerancia periférica y la muerte celular inducida por activación de linfocitos T maduros, lo que resalta su papel en la homeostasia inmune.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 200-300 del dominio extracelular de Fas humano. Esta región está conservada en humano, ratón y rata, lo que sustenta la reactividad cruzada.
• Para Western blot, se pueden observar múltiples bandas entre 9-38 kDa debido al empalme alternativo, la glucosilación y la desprendimiento de la membrana. Valide la especificidad de las bandas usando controles adecuados.
• Al realizar ELISA, considere usar el fragmento recombinante de Fas como control positivo y preincubar el anticuerpo con el inmunógeno para confirmar la especificidad.
• Para estudios que involucran activación de células inmunitarias, tenga en cuenta que la expresión de las isoformas de Fas cambia tras la estimulación, por lo que el tiempo y el tipo celular son críticos para la detección.

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