Anticuerpo policlonal de conejo anti-sintasa de ácidos grasos (FASN) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49327

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la sintasa de ácidos grasos (FASN)

• La sintasa de ácidos grasos es una proteína multienzimática que cataliza la biosíntesis de novo de palmitato, un ácido graso saturado de cadena larga, a partir de acetil-CoA y malonil-CoA en presencia de NADPH. Alberga siete actividades catalíticas distintas y un sitio de unión para un grupo prostético de 4'-fosfopanteteína (dominio de la proteína transportadora de acilos).
• La enzima desempeña un papel central en la biosíntesis de lípidos y es esencial para la síntesis de membranas y el almacenamiento de energía. Su actividad está estrechamente vinculada a los estados metabólicos celulares y suele estar aumentada en el cáncer y los trastornos metabólicos.
• FASN se localiza predominantemente en el citoplasma y también se ha detectado en los melanosomas, donde su actividad contribuye a la síntesis de melanina.
• Se expresa de forma ubicua, con niveles particularmente altos en el cerebro, los pulmones, el hígado y la glándula mamaria, lo que refleja su importancia en los tejidos lipogénicos.
• La proteína está sujeta a múltiples modificaciones postraduccionales, incluidas la acetilación, la fosforilación, la S-nitrosilación y la ubiquitinación, que regulan su actividad, estabilidad y distribución subcelular.
• Durante la infección, la actividad de FASN es necesaria para la replicación del SARS-CoV-2, lo que pone de manifiesto un posible punto de intervención terapéutica.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Debido al elevado peso molecular de FASN (~273 kDa), considere utilizar geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, del 6 % o geles en gradiente) y tiempos prolongados de transferencia húmeda para el Western blot. Se recomienda un marcador preteñido de alto peso molecular.
• Para la inmunohistoquímica (IHC-P) y la inmunofluorescencia (IF/ICC), puede ser necesaria la recuperación antigénica con tampón de citrato (pH 6,0) o tampón de EDTA (pH 9,0). Verifique las condiciones óptimas en sus modelos de tejidos y líneas celulares.
• En las aplicaciones de ELISA, utilice el inmunógeno recombinante como control positivo. Titule tanto los anticuerpos de captura como los de detección para establecer las concentraciones de trabajo.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con FASN de ratón y rata, lo que sugiere la conservación del epítopo inmunogénico; no obstante, el rendimiento en cada especie debe validarse en el sistema de muestra correspondiente.

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