Anticuerpo policlonal anti-FCAR para WB, IF/ICC, ELISA - P24071

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de FCAR (CD89)

• FCAR, también conocido como CD89, es una glicoproteína transmembrana de tipo I y el receptor de la inmunoglobulina alfa (IgA), perteneciente a la superfamilia de las inmunoglobulinas.
• La proteína media funciones efectoras inmunitarias como la producción de citoquinas, la fagocitosis y la degranulación tras la unión a complejos inmunes de IgA.
• FCAR se expresa de forma diferencial en las células mieloides: los monocitos expresan las tres isoformas principales (A.1, A.2, A.3), mientras que los macrófagos alveolares suelen expresar solo una isoforma de superficie.
• La localización subcelular incluye la membrana celular; además, se pueden generar formas secretadas mediante corte y empalme alternativo o desprendimiento proteolítico.
• Las características estructurales clave incluyen dos dominios extracelulares similares a Ig, una única hélice transmembrana y una cola citoplasmática corta que carece de motivos de señalización clásicos; la señalización ocurre a través de la asociación con la cadena γ común de FcR.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glicosilación ligada a N en múltiples sitios y la formación de puentes disulfuro, lo que contribuye a la estabilidad y a la unión del ligando.
• Los estudios funcionales implican a FCAR tanto en la inmunidad sistémica como en la de las mucosas, con funciones en las respuestas inflamatorias y en la regulación de la homeostasis inmunitaria.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aa 60-287), que se predice que está bien expuesto para su detección. Para Western blot, tenga en cuenta que el peso molecular observado puede ser mayor (~45-65 kDa) debido a la glicosilación.
• Para IF/ICC, utilice permeabilización si el objetivo es la cola citoplasmática o si la isoforma es predominantemente intracelular; para la tinción de superficie, puede ser factible el marcado de células vivas con el anticuerpo.
• Dado que FCAR se expresa en células mieloides primarias, las muestras de control positivo relevantes incluyen células mononucleares de sangre periférica (PBMC) humanas o lisados de bazo de ratón.
• Las aplicaciones de ELISA pueden optimizarse utilizando proteínas de fusión recombinantes FCAR-Fc como captura/estándar; tenga en cuenta que el anticuerpo detecta tanto las formas unidas a la membrana como las solubles.
• Se ha reportado reactividad cruzada con ratón; sin embargo, la homología de secuencia en el dominio extracelular es solo de aproximadamente el 50%, por lo que debe validarse en su cepa y tejido de ratón específicos.

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