Anticuerpo policlonal de conejo anti-FCN1 para WB y ELISA - O00602

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Ficolina-1

• La ficolina-1 (también conocida como ficolina-M, ficolina-A, ficolina-alfa) es una lectina similar al colágeno secretada de 35 kDa codificada por el gen FCN1 (GeneID: 2219) que pertenece a la familia de moléculas de reconocimiento de patrones ficolina.
• Actúa como un receptor de reconocimiento de patrones que se une a estructuras de carbohidratos específicas en superficies de patógenos para iniciar la vía de activación del complemento por lectina a través de la activación de la serina proteasa MASP1, lo que conduce a la fagocitosis de patógenos y señalización inmunitaria adaptativa. Referencias relacionadas: PMID:16116205, PMID:17897951, PMID:20032467
• Reconoce preferentemente derivados de ácido siálico 9-O-acetilados enlazados 2-6 y glicanos que contienen ácido siálico con enlaces 2-3. Referencias relacionadas: PMID:20032467, PMID:20400674
• También puede activar monocitos a través del receptor acoplado a proteína G FFAR2, induciendo la secreción de interleucina-8/IL-8. Referencias relacionadas: PMID:21037097
• Localizada como proteína secretada y anclada en la superficie celular de células inmunitarias.
• Expresada en leucocitos de sangre periférica, monocitos y granulocitos; también detectada en bazo, pulmón y timo (atribuido a macrófagos tisulares). No se encuentra en linfocitos.
• Contiene una región similar al colágeno y un dominio de lectina similar al fibrinógeno; la unión dependiente de calcio y la formación de enlaces disulfuro contribuyen a su oligomerización e integridad estructural (estructura 3D resuelta; identificación proteómica; proteoma de referencia; péptido señal).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 30–326, cubriendo casi toda la longitud de FCN1; se espera que el anticuerpo policlonal resultante se dirija a múltiples epítopos, proporcionando una señal robusta tanto en condiciones desnaturalizantes (WB) como nativas (ELISA).
• Para Western blot, reduzca las muestras con DTT/β-mercaptoetanol para detectar la forma monomérica de 35 kDa; tenga en cuenta que los oligómeros unidos por disulfuro pueden aparecer a masas moleculares más altas en condiciones no reductoras.
• Valide la especificidad en muestras que expresen FCN1 conocidas (por ejemplo, células mononucleares de sangre periférica humana, líneas monocíticas U937 o THP-1) y utilice un control negativo (linfocitos o knockdown) para confirmar la banda de interés.
• En ELISA, realice titulaciones en tablero de ajedrez utilizando ficolina-1 recombinante o suero para optimizar las concentraciones de anticuerpo de recubrimiento y detección; considere probar el anticuerpo como componente de captura y de detección.
• Cuando utilice muestras de ratón o rata, verifique la reactividad con controles positivos específicos de especie, ya que la homología de secuencia es ~80%, pero el reconocimiento del epítopo puede variar.
• Recoja sangre y prepare suero/plasma en condiciones que eviten la activación no intencionada del complemento para evitar el consumo de proteínas o la formación de complejos.
• La consistencia entre lotes puede diferir entre anticuerpos policlonales; solicite muestras de retención o realice un estudio de puente si cambia entre lotes para ensayos críticos.

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