Anticuerpo Policlonal Anti-FH (Fumarato Hidratasa) para WB, ELISA - P07954

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la FH (Fumarato Hidratasa)

• La FH cataliza la hidratación reversible de fumarato a L-malato en el ciclo de Krebs, un paso clave en la producción de energía mitocondrial (PubMed:30761759). Referencias relacionadas: PMID:30761759

• Las isoformas citosólicas de la FH participan en el ciclo de la urea y el metabolismo de la arginina, produciendo fumarato como subproducto (Por similitud).

• La FH está anotada como un supresor tumoral y una proteína variante de enfermedad; las mutaciones están vinculadas a síndromes de cáncer hereditario como HLRCC.

• En respuesta al daño del ADN, la FH es fosforilada por PRKDC y se transloca al núcleo, donde promueve la reparación por NHEJ al inhibir la demetilasa KDM2B, lo que conduce a un aumento de H3K36me2 en los DSB (PubMed:20231875, PubMed:26237645). Referencias relacionadas: PMID:20231875, PMID:26237645

• La FH se localiza principalmente en las mitocondrias, pero también en el citosol; la acumulación nuclear ocurre después del daño del ADN (PubMed:26237645).

• La iniciación alternativa produce diferentes isoformas que pueden favorecer reacciones de hidratación o deshidratación (Probable).

• La FH se expresa en glóbulos rojos y está subexpresada en pacientes con anemia hemolítica hereditaria no esferocítica de etiología desconocida.

• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación; la fosforilación mediada por PRKDC en los DSB es crítica para su papel en la reparación del ADN.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 50–150 de la FH humana; considere usar controles positivos como lisados de HeLa o HEK293T para WB.
• Para Western blotting, se debe observar una banda específica a ~55 kDa; utilice controles de carga y marcadores de peso molecular apropiados.
• La fraccionamiento subcelular puede mejorar la detección de los grupos de FH mitocondrial o nuclear.
• Para ELISA, optimice el antígeno de recubrimiento y la titulación de anticuerpos para lograr las mejores relaciones señal/ruido.
• La reactividad cruzada con FH de ratón y rata permite estudios multiespecie; valide en su sistema experimental.
• La preadsorción con el péptido inmunizante puede confirmar la especificidad de la banda.

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