Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fibrillarin/U3 RNP para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P22087

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Fibrillarin/U3 RNP

• La fibrilarina, codificada por el gen FBL (también conocido como FIB1, FLRN), es una proteína nucleolar altamente conservada y se identificó originalmente como el antígeno de esclerodermia nucleolar de 34 kDa.
• Funciona como una metiltransferasa dependiente de S-adenosil-L-metionina que cataliza la metilación 2'-O específica del sitio de los residuos de ribosa en el ARN ribosómico precursor (pre-rRNA), guiada por ARN nucleolares pequeños C/D (snoRNAs) (Por similitud). Referencias relacionadas: PMID:30540930
• La fibrilarina es un componente central del procesoma de la subunidad pequeña (SSU), el precursor más temprano de la subunidad ribosómica pequeña, ayudando en el plegamiento, modificaciones y escisión del pre-rRNA. Referencias relacionadas: PMID:34516797
• Más allá de la metilación de ARN, la fibrilarina actúa como una metiltransferasa de proteínas, mediando la metilación de la histona H2A en la glutamina 105 (H2AQ104me), lo que impide la unión del complejo FACT en el locus del ADN ribosómico. Referencias relacionadas: PMID:24352239, PMID:30540930
• También cataliza la metilación 2'-O del ARN nuclear pequeño U6 (snRNA) dentro de complejos RNP C/D, una modificación crítica para la fidelidad del empalme del pre-mRNA. Referencias relacionadas: PMID:32017898
• A nivel subcelular, la fibrilarina reside predominantemente en el nucléolo, con presencia adicional en el nucleoplasma, reflejando sus roles en el procesamiento del ARN ribosómico y el empalme.
• Las modificaciones postraduccionales de la fibrilarina incluyen acetilación, fosforilación y metilación, así como la formación de enlaces de isopéptido y conjugación tipo ubiquitina, que pueden regular su actividad y localización.
• La proteína tiene un peso molecular de 33784 Da y se estudia ampliamente como un marcador de la estructura y función nucleolar.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 100-321) cubre una región central de la fibrilarina, que es altamente conservada entre especies; se espera reactividad cruzada con ratón, rata y mono.
• En el Western blot, se debe observar una banda principal a aproximadamente 34 kDa, correspondiente a la proteína de longitud completa; pueden aparecer bandas adicionales debido a modificaciones postraduccionales o isoformas.
• Para inmunofluorescencia, la fibrilarina se localiza en el nucléolo y el nucleoplasma; la tinción simultánea con marcadores nucleolares como la nucleolina puede validar la especificidad.
• Para inmunoprecipitación, optimice la concentración de anticuerpo y las condiciones de incubación; considere usar extractos nucleares para enriquecer la proteína objetivo.
• Realice los controles apropiados (por ejemplo, péptido de bloqueo, lisados de knockout) para confirmar la especificidad del anticuerpo en su sistema de ensayo.

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