Anticuerpo monoclonal de conejo anti-filaggrina (FLG) para WB y ELISA - P20930

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la filaggrina

• La filaggrina (FLG) es una proteína grande, rica en histidina y altamente fosforilada que constituye un componente estructural clave en la diferenciación epidérmica.
• Agrega los filamentos intermedios de queratina en macrofibrillas densas y promueve la formación de enlaces disulfuro, lo que contribuye a la resistencia mecánica y la función de barrera de la piel.
• La FLG se sintetiza inicialmente como profilagrina y se almacena en gránulos de queratohialina; tras la diferenciación terminal, se procesa proteolíticamente en péptidos de filaggrina funcionales.
• Subcelularmente, la filaggrina se localiza en los gránulos de queratohialina citoplasmáticos dentro de los queratinocitos de la capa granular.
• La expresión tisular es predominantemente en la piel (estrato granuloso), pero también se detecta en timo, estómago, amígdalas, testículo, placenta, riñón, páncreas, glándula mamaria, vejiga, tiroides, glándula salival y tráquea, mientras que está ausente en corazón, cerebro, hígado, pulmón, médula ósea, intestino delgado, bazo, próstata, colon y glándula suprarrenal. En la piel, se expresa principalmente en el estrato granuloso de la epidermis. Referencias relacionadas: PMID:19384417 PMID:1429717
• Las modificaciones postraduccionales incluyen una extensa fosforilación y citrulinación, que regulan su procesamiento y función.
• Las mutaciones en FLG están asociadas con la ictiosis vulgar y la dermatitis atópica, lo que resalta su papel en el mantenimiento de la integridad de la barrera cutánea.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-92) de la FLG humana, por lo que puede reconocer tanto el precursor de profilagrina como la filaggrina procesada. Se recomienda incluir inhibidores de proteasas durante la preparación de muestras para evitar la degradación.
• Para Western blot, se pueden usar lisados de queratinocitos de piel humana (por ejemplo, células HaCaT bajo diferenciación inducida por calcio) o extractos de tejido de piel para detectar la profilagrina de longitud completa de ~435 kDa y sus fragmentos proteolíticos. Valide el anticuerpo en el sistema de muestra correspondiente.
• Este anticuerpo es adecuado para ELISA; al combinarlo con un anticuerpo de detección compatible, se pueden realizar inmunoensayos sándwich sensibles para la cuantificación de filaggrina en fluidos biológicos o sobrenadantes celulares.
• La reactividad cruzada con ratón y rata ha sido confirmada; asegúrese de optimizar los protocolos específicos por especie cuando utilice muestras no humanas.

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