Anticuerpo policlonal de conejo Anti-FOXO1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q12778

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de FOXO1

• FOXO1 (proteína de caja Forkhead O1, también conocida como FKHR o FOXO1A) es un factor de transcripción de la familia de la caja Forkhead, con un peso molecular de aproximadamente 70 kDa (valor predicho de 69.7 kDa).
• Actúa como objetivo principal de la señalización de insulina, regulando la homeostasis metabólica en respuesta al estrés oxidativo (PubMed:10358076, PubMed:12228231, PubMed:15220471). Referencias relacionadas: PMID:10358076 PMID:12228231 PMID:15220471
• FOXO1 se une al elemento de respuesta a insulina (IRE) y al elemento de unión de la familia Daf-16 (DBE) para modular la transcripción de genes diana, y su actividad es suprimida por la insulina (PubMed:10358076). Referencias relacionadas: PMID:10358076
• Sus funciones clave incluyen promover la gluconeogénesis en hepatocitos mediante la cooperación con PPARGC1A y CEBPA (PubMed:17024043), controlar el equilibrio redox y la masa ósea, y regular el número de osteoblastos y la diferenciación condrogénica (Por similitud). Referencias relacionadas: PMID:17024043
• FOXO1 es un regulador importante de la muerte celular, promoviendo la apoptosis en células neuronales (PubMed:18356527), células del músculo liso cardíaco (PubMed:19483080) y la muerte celular mediada por autofagia (PubMed:20543840). Referencias relacionadas: PMID:18356527 PMID:19483080 PMID:20543840
• Su localización subcelular es dinámica: FOXO1 se desplaza entre el citoplasma y el núcleo en respuesta a modificaciones postraduccionales como la fosforilación y la acetilación.
• Se expresa abundantemente en el músculo esquelético y el ovario, con niveles menores en corazón, placenta, pulmón, hígado, páncreas, bazo, testículo e intestino delgado, y una expresión débil en cerebro, timo, próstata y colon (PubMed:9479491). Referencias relacionadas: PMID:9479491
• FOXO1 está sujeto a múltiples modificaciones postraduccionales, que incluyen acetilación, fosforilación, metilación y ubiquitinación, que modulan su actividad transcripcional y estabilidad.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 340–580 dentro de la región reguladora C-terminal de FOXO1, que contiene sitios críticos de fosforilación y acetilación; por lo tanto, este anticuerpo puede detectar tanto las formas totales como las modificadas. Se recomienda realizar la validación con tratamiento de fosfatasa o desacetilasa al evaluar estados de modificación específicos.
• Para Western blot (WB), se espera una banda de ~70 kDa; incluya controles positivos como lisados de HeLa, HepG2 o músculo esquelético, ya que FOXO1 se expresa fuertemente en estos tejidos.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), FOXO1 se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, y el estrés oxidativo o la deprivación de suero promueven su translocación nuclear. Optimice las condiciones de fijación y permeabilización para preservar la localización endógena.
• Para ELISA, se recomienda asociarlo con un anticuerpo de detección dirigido a un epítopo distinto para aumentar la especificidad; confirme el rendimiento utilizando la proteína recombinante de FOXO1.
• Al tratarse de un anticuerpo policlonal de conejo, puede haber variabilidad entre lotes; se recomienda realizar una validación independiente con silenciamiento mediado por siRNA o un péptido de bloqueo para experimentos críticos.

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