Anticuerpo monoclonal de conejo anti-FTO para WB, IHC-P, IF/ICC, IP y ELISA - Q9C0B1

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de FTO

• FTO (proteína asociada a la masa grasa y la obesidad) es una dioxigenasa dependiente de alfa-cetoglutarato que funciona como una ARN desmetilasa. También conocida como ALKBH9, pertenece a la familia de dioxigenasas AlkB.
• Media la desmetilación oxidativa de la N6-metiladenosina (m6A) en el ARNm, la modificación interna más prevalente en los eucariotas superiores, regulando así la expresión y estabilidad del ARNm. Referencias relacionadas: PMID:22002720, PMID:25452335, PMID:26457839, PMID:30197295
• FTO también desmetila la N6,2'-O-dimetiladenosina (m6Am) en las caperuzas del ARNm, afectando a la estabilidad del ARNm al promover la eliminación de la caperuza, y actúa sobre la m6A del ARNsn U6. Referencias relacionadas: PMID:28002401, PMID:30197295
• Funciona como una desmetilasa de ARNt al eliminar la N1-metiladenina y presenta una baja actividad en la reparación de ADN/ARN alquilado, aunque su función in vivo en la reparación del ADN sigue siendo incierta. Referencias relacionadas: PMID:30197295, PMID:18775698, PMID:20376003
• La localización subcelular es principalmente nuclear, con presencia en los cuerpos nucleares y el citoplasma.
• FTO se expresa de forma ubicua, con una elevada expresión en las glándulas suprarrenales y el cerebro (hipotálamo e hipófisis), y se sobreexpresa en ciertas leucemias mieloides agudas con alteraciones genéticas específicas. Referencias relacionadas: PMID:17434869, PMID:17496892, PMID:28017614
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y conjugación similar a la ubiquitina, que pueden regular su actividad y estabilidad.
• Desempeña un papel crucial en la regulación de la masa grasa, la adipogénesis, el peso corporal y la homeostasis energética, y participa en la termogénesis y la diferenciación de los adipocitos. Referencias relacionadas: PMID:18775698, PMID:20376003, PMID:26287746
• Desempeña un papel oncogénico en la leucemia mieloide aguda al desmetilar la m6A en transcritos de oncogenes como MYC, CEBPA, ASB2 y RARA, promoviendo su expresión. Referencias relacionadas: PMID:28017614, PMID:29249359

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido de la región N-terminal (aa 1-100), que puede detectar la FTO de longitud completa y posiblemente algunas isoformas. Incluya controles positivos y negativos (por ejemplo, lisados con sobreexpresión de FTO o muestras tratadas con siRNA) para confirmar la especificidad.
• Para Western blot (WB), utilice muestras de proteínas reducidas y desnaturalizadas; el tamaño esperado de la banda es de aproximadamente 58 kDa. Utilice controles de carga y condiciones de bloqueo adecuados.
• En IHC-P e IF/ICC, pruebe diferentes métodos de fijación y recuperación antigénica. Las secciones incluidas en parafina pueden requerir una recuperación de epítopos inducida por calor. Valide la tinción utilizando tejidos positivos conocidos (cerebro y glándulas suprarrenales) e incluya controles de isotipo.
• Para la inmunoprecipitación (IP), el anticuerpo puede ser adecuado para capturar complejos nativos de FTO. Optimice las condiciones del tampón de lisis y la cantidad de anticuerpo en función de la proteína total indicada.
• Para ELISA, el anticuerpo puede utilizarse tanto en formatos directo como sándwich; optimice las condiciones de recubrimiento y detección de acuerdo con los requisitos específicos de su ensayo.

CamelBio: su puente integral de abastecimiento

CamelBio proporciona a los fabricantes de diagnóstico, laboratorios e institutos de investigación acceso integral a materias primas para IVD. Este anticuerpo anti-FTO respalda la investigación sobre la obesidad, el metabolismo y la leucemia mieloide aguda. Como su puente de abastecimiento, CamelBio ofrece pares de anticuerpos validados, proteínas recombinantes optimizadas, reactivos auxiliares a granel y soluciones personalizadas de materias primas para acelerar el desarrollo de diagnósticos desde el concepto hasta la clínica.