Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-FTO para WB, IP, ELISA - Q9C0B1

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del FTO

• El FTO (proteína asociada a la masa grasa y la obesidad) es una dioxigenasa dependiente de alfa-cetoglutarato que funciona como una desmetilasa de ARN, catalizando la desmetilación oxidativa de N6-metiladenosina (m6A) en el ARNm, ARNsn U6 y la modificación m6A(m) en el casquete 5'. Referencias relacionadas: PMID:22002720, PMID:25452335, PMID:26457839, PMID:30197295, PMID:28002401
• También desmetila la N1-metiladenina en los ARNt y puede reparar el ADN/ARN alquilado in vitro, aunque la relevancia in vivo es incierta. Referencias relacionadas: PMID:30197295, PMID:18775698, PMID:20376003
• Al modular los niveles de m6A, el FTO regula la estabilidad, el empalme y la traducción del ARNm, influyendo así en la adipogénesis, el peso corporal y la homeostasis energética. Referencias relacionadas: PMID:18775698, PMID:26287746
• El FTO se expresa ubicuamente con los niveles más altos en las glándulas suprarrenales y el cerebro (particularmente el hipotálamo y la pituitaria), y se sobreexpresa en ciertas leucemias mieloides agudas (LMA) con reordenamientos genéticos específicos. Referencias relacionadas: PMID:17434869, PMID:17496892, PMID:28017614
• La localización subcelular incluye el núcleo (con enriquecimiento en speckles nucleares) y el citoplasma, lo que refleja sus roles en el procesamiento y traducción del ARN.
• El FTO pertenece a la familia de dioxigenasas ALKBH y contiene un dominio de unión a hierro y 2-oxoglutarato esencial para su actividad catalítica.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y conjugación tipo ubiquitina, que pueden regular su estabilidad y actividad.
• El FTO actúa como un oncogén en la LMA al desmetilar y estabilizar los ARNm de factores leucemogénicos como MYC y CEBPA. Referencias relacionadas: PMID:28017614, PMID:29249359

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 327–504 (región C-terminal) del FTO humano. Se espera que este anticuerpo policlonal reconozca múltiples epítopos, proporcionando una detección robusta en condiciones desnaturalizantes y nativas.
• Para el Western blot (WB), el peso molecular predicho es de ~58 kDa; valide la expresión en lisados de control positivo (p. ej., cerebro, líneas celulares de LMA) y considere el uso de inhibidores de fosfatasas para preservar los estados de fosforilación.
• En la inmunoprecipitación (IP), el anticuerpo puede capturar complejos de FTO-ARN; realice un entrecruzamiento o use condiciones libres de ARNasa si se van a preservar las interacciones ARN-proteína.
• Para ELISA, confirme la especificidad mediante recubrimiento con FTO recombinante y ensayos de inhibición competitiva; la reactividad cruzada listada con ratón y rata permite diseños de estudio multi-especie.
• Al comparar la expresión entre tejidos o tratamientos, confirme una carga igual y tenga en cuenta la regulación dinámica del FTO por vías metabólicas y de estrés.

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