Anticuerpo monoclonal anti-furina para WB y ELISA - P09958

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la furina

• La furina (PCSK3) es una endoproteasa de serina dependiente del calcio que pertenece a la familia de las proproteínas convertasas, también conocida como enzima de escisión de residuos de aminoácidos básicos pareados (PACE) y enzima de procesamiento dibásico.
• La furina reconoce y escinde precursores polipeptídicos en la secuencia consenso RX(K/R)R, desempeñando un papel fundamental en la maduración de las proproteínas dentro de la vía secretora constitutiva. Referencias relacionadas: PMID:11799113, PMID:1629222, PMID:1713771
• Procesa proteínas clave como el factor de crecimiento transformante beta-1 (TGFB1) y la prohormona del factor natriurético cerebral, convirtiéndolas en sus formas activas. Referencias relacionadas: PMID:7737999, PMID:20489134, PMID:21763278
• La furina circula entre la red trans del aparato de Golgi, la superficie celular y los endosomas, y también se secreta en forma soluble.
• La proteína experimenta una escisión autocatalítica para generar la enzima activa y contiene enlaces disulfuro, sitios de glicosilación y sitios de fosforilación que regulan su función.
• La furina se expresa de forma ubicua en los tejidos humanos, lo que refleja su papel central en el procesamiento de una amplia variedad de proteínas secretadas y de membrana.
• Numerosos patógenos utilizan la furina para activar sus proteínas de superficie, incluidas la gp160 del VIH-1, la hemaglutinina de la gripe y la proteína espiga del SARS-CoV-2, lo que la convierte en una diana para la investigación antiviral.
• Al procesar la subunidad accesoria ATP6AP1 de la V-ATPasa, la furina regula indirectamente la acidificación de los gránulos secretores en las células de los islotes pancreáticos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético de los aminoácidos 200–300; es probable que el anticuerpo reconozca un epítopo lineal, lo que lo hace adecuado para aplicaciones desnaturalizantes como el Western blot. Para aplicaciones nativas como ELISA, valide la unión en condiciones no desnaturalizantes.
• En el Western blot, se espera una banda de aproximadamente 87 kDa para la furina de longitud completa. Debido al procesamiento de la proproteína, también pueden aparecer bandas adicionales correspondientes a la proforma y a las formas maduras escindidas.
• La expresión ubicua permite utilizar muchas líneas celulares como controles positivos; considere células HeLa, HEK293 o A549. Se indica reactividad cruzada con ratón, pero verifique la homología de secuencia en la región del inmunógeno al analizar otras especies.
• Para ELISA, optimice las condiciones de recubrimiento y los títulos de anticuerpos, ya que el inmunógeno peptídico puede influir en el reconocimiento de la proteína nativa.

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