Anticuerpo policlonal de conejo Anti-GABRD para WB, ELISA - O14764

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de GABRD

• La subunidad delta del receptor del ácido gamma-aminobutírico (GABRD) es una subunidad de los receptores GABA(A) heteropentaméricaos, que son canales de cloro activados por ligando, regulados por el principal neurotransmisor inhibitorio GABA. Cuando se activan, los GABAAR permiten el flujo selectivo de iones cloruro, mediando la transmisión sináptica inhibitoria rápida. Referencias relacionadas: PMID:35355020
• Como subunidad delta, los receptores que contienen GABRD se localizan predominantemente en posiciones extrasinápticas o perisinápticas, especialmente en el hipocampo y las células granulares del cerebelo, y contribuyen a la inhibición GABAérgica tónica, regulando la excitabilidad neuronal.
• El complejo del receptor GABA(A) está formado por cinco subunidades dispuestas alrededor de un poro central; los sitios de unión a GABA se encuentran en las interfaces entre las subunidades alfa y beta. Es probable que GABRD se asocie con las subunidades alfa y beta para formar canales funcionales.
• GABRD es una glicoproteína transmembranal con un enlace disulfuro y sufre fosforilación, como se indica en su anotación como glicoproteína y fosfoproteína.
• A nivel subcelular, GABRD se localiza en la membrana celular, lo que coincide con su función como receptor de canal iónico.
• Estudios funcionales indican que los GABAAR alfa-4-beta-3-delta pueden unirse simultáneamente a GABA e histamina, con la unión de histamina en la interfaz de dos subunidades beta vecinas, regulando potencialmente el sueño y la vigilia. Referencias relacionadas: PMID:35355020
• Clínicamente, las mutaciones en GABRD están asociadas a epilepsia y otras variantes de enfermedades, lo que pone de relieve su importancia para la función neurológica.
• GABRD también se conoce con nombres alternativos como subunidad delta del receptor GABA(A) y con alias génicos EJM7, EIG10, GEFSP5.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es una proteína de fusión recombinante que cubre los aminoácidos 31-248 de GABRD humano, correspondiente al dominio extracelular N-terminal. Este diseño se dirige a una región accesible en el receptor nativo y puede ser adecuado para detectar proteínas tanto desnaturalizadas como nativas.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de 51 kDa; sin embargo, debido a la glicosilación y otras modificaciones postraduccionales, la banda observada puede migrar con un peso molecular aparente mayor. Se recomienda el uso de enzimas desglicosilantes si se necesita una determinación precisa del tamaño.
• El anticuerpo reacciona de forma cruzada con GABRD de rata, lo que implica homología de secuencia en la región del inmunógeno entre humanos y ratas. Los investigadores también pueden evaluar la reactividad cruzada con otras especies mediante alineamiento de secuencias.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede usarse potencialmente como reactivo de captura o detección para la proteína GABRD recombinante o preparaciones de receptores enriquecidos. Se recomienda la titulación y la optimización de tampones.
• Dado el papel de GABRD en la inhibición tónica, este anticuerpo puede ser útil en inmunohistoquímica o inmunocitoquímica después de una validación adecuada, aunque solo se enumeran WB y ELISA en las especificaciones del producto; las aplicaciones alternativas requieren una optimización individual.

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