Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-GALNT3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14435

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de GALNT3

• GALNT3 codifica la polipéptido N-acetilgalactosaminiltransferasa 3 (GalNAc-T3), una proteína de membrana de tipo II que inicia la O-glicosilación de tipo mucina transfiriendo N-acetil-D-galactosamina (GalNAc) a residuos de serina o treonina de las proteínas objetivo.
• Cataliza el primer paso comprometido en la biosíntesis de oligosacáridos O-ligados, una modificación crítica para la estabilidad de las proteínas, la secreción y las interacciones en la superficie celular. Referencias relacionadas: PMID:16638743, PMID:31932717, PMID:8663203
• Los sustratos incluyen la glicoproteína de envoltura del VIH gp120, EA2, MUC2, MUC1A, MUC5AC, fibronectina y el factor de crecimiento de fibroblastos 23 (FGF23), lo que demuestra diversos roles en la modificación de envolturas virales, producción de mucinas, biología de la matriz y el metabolismo fosfato. Referencias relacionadas: PMID:8663203, PMID:9295285, PMID:16638743, PMID:31932717
• La glicosilación de FGF23 por GALNT3 es esencial para la secreción de FGF23 intacto; las mutaciones con pérdida de función causan calcinosis tumoral familiar hiperfosfatémica (HFTC) y el síndrome de hiperostosis-hiperfosfatemia. Referencias relacionadas: PMID:16638743, PMID:31932717
• Se encuentra en la membrana del aparato de Golgi, lo que es consistente con su papel en la modificación postraduccional dentro de la vía secretora.
• La expresión tisular es más alta en órganos que contienen glándulas epiteliales secretoras: páncreas, piel, riñón y testículos, con niveles más bajos en próstata, ovario, intestino, colon, placenta y pulmón.
• Contiene una hélice transmembrana, una región de tallo y dominios catalíticos y de lectina en tándem; requiere manganeso para su actividad y sufre empalme alternativo y autoglicosilación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aa 43–160) se encuentra en la región del tallo/catalítica N-terminal; la naturaleza policlonal probablemente proporciona detección en condiciones desnaturalizantes y nativas, lo que lo hace compatible con WB, IHC-P, IF/ICC y ELISA.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de ~73 kDa; debido a la glicosilación específica del tejido, las bandas pueden desplazarse. Considere usar lisados pancreáticos o renales como controles positivos e incluir enzimas desglicosilantes para confirmar la especificidad.
• En IHC-P e IF/ICC, anticipe una señal alta en páncreas, piel, riñón y testículos. Optimice la recuperación de antígenos y el bloqueo para cada tipo de tejido, y valide con un control negativo relevante.
• Para ELISA, utilice un par de anticuerpos emparejados que reconozcan un epítopo que no se superponga para evitar la competencia. Confirme la detección de la proteína recombinante GALNT3 como estándar.
• Aunque es reactiva cruzada con ratón y rata, verifique la identidad de la secuencia dentro de la región del inmunógeno si se planean comparaciones entre especies; ejecute controles de IgG coincidentes con la especie para descartar uniones inespecíficas.
• Como preparación policlonal, la consistencia entre lotes puede variar. Para ensayos cuitativos críticos, revalide cada nuevo lote con su sistema de muestras específico.

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