PolymAb® de conejo anti-GATA3 para WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ChIP, ELISA - P23772

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de GATA3

• GATA3 (factor de unión a GATA 3) es un activador transcripcional que se une al potenciador de los genes alfa y delta del receptor de linfocitos T, reconociendo la secuencia consenso 5'-AGATAG-3'; es necesario para la diferenciación de linfocitos T ayudadores 2 (Th2) durante las respuestas inmunitarias e inflamatorias.
• Regula positivamente la expresión de ASB2, lo que lo vincula a vías de degradación de proteínas. Referencias relacionadas: PMID:31175139
• Coordina la activación transcripcional de macrófagos y la reprogramación metabólica dependiente de UCP2 en respuesta a IL33, impulsando la diferenciación de macrófagos activados alternativamente que resuelven la inflamación después de una lesión tisular.
• Se localiza en el núcleo, lo que coincide con su función de factor de transcripción de unión al ADN.
• Muestra expresión específica de linfocitos T, fundamental para el desarrollo y las funciones efectoras de estas células.
• Contiene dos dominios de dedos de zinc tipo C4 que median la unión al ADN y la regulación transcripcional.
• Sus modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación, que modula su actividad reguladora.
• Se clasifica como un activador de unión al ADN implicado en la inmunidad, la inmunidad innata y la regulación de la transcripción; es miembro de la familia GATA de proteínas de dedos de zinc.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 135-258 de GATA3 de ratón, incluyendo el dominio de unión al ADN de dedos de zinc; esta región está altamente conservada, por lo que es probable que el anticuerpo reconozca la proteína nativa en múltiples aplicaciones.
• Para Western blotting, se espera una banda cerca de 48 kDa; considere usar extractos nucleares como control positivo y validar con lisados de linfocitos T adecuados.
• En inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), verifique la eficiencia de unión mediante PCR cuantitativa en loci diana conocidos de GATA3 y optimice las condiciones de reticulación para su tipo celular.
• Para inmunofluorescencia e inmunohistoquímica, se prevé tinción nuclear; incluya siempre un control sin anticuerpo primario y confirme la especificidad usando modelos knockout de Gata3 o muestras tratadas con siRNA.
• Realice una titulación del anticuerpo para cada aplicación y valídelo en el sistema biológico correspondiente (humano, ratón o rata) para establecer las diluciones de trabajo óptimas.

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