Anticuerpo policlonal de conejo anti-GCDH para WB, IHC-P, ELISA - Q92947

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de GCDH

• La proteína GCDH (glutamil-CoA deshidrogenasa), también conocida como GCD o ACAD5, cataliza la descarboxilación oxidativa de glutamil-CoA a crotonil-CoA y CO₂ en la matriz mitocondrial. Esta reacción es un paso clave en la degradación de L-lisina, L-hidroxilisina y L-triptófano.
• Como miembro de la familia de las acil-CoA deshidrogenasas, GCDH utiliza la flavoproteína de transferencia de electrones (ETF) como aceptor de electrones, y su actividad es esencial para un catabolismo adecuado de los aminoácidos.
• La isoforma corta de GCDH, generada por empalme alternativo, es catalíticamente inactiva, lo que sugiere una complejidad regulatoria. Tanto la isoforma larga como la corta se expresan en fibroblastos e hígado.
• GCDH se localiza en la matriz mitocondrial, lo que coincide con su papel en las vías de oxidación de ácidos grasos y aminoácidos.
• La proteína es una flavoproteína que une FAD como cofactor, y su deficiencia causa la aciduria glutárica tipo I, un trastorno metabólico grave caracterizado por daño neurológico y acumulación de ácidos orgánicos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la acetilación, que puede modular su actividad o estabilidad.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 149-438 de la GCDH humana (NP_000150.1). Esta región cubre parte del dominio catalítico, por lo que es probable que genere anticuerpos que reconozcan tanto la isoforma larga como la corta, si el epitopo está presente en ambas.
• Para Western blotting, se espera una banda alrededor de 48 kDa según el peso molecular predicho; sin embargo, la movilidad observada puede variar debido a modificaciones postraduccionales o diferencias entre isoformas. Valide el peso molecular con controles conocidos en su sistema de muestras.
• Se ha reportado que el anticuerpo reacciona con muestras de humano, ratón y rata. Para otras especies, debe comprobarse la homología de secuencia antes de su uso y verificarse experimentalmente la reactividad cruzada.
• Al realizar IHC-P, las condiciones de recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón de citrato pH 6,0 o tampón EDTA pH 9,0) y las diluciones del anticuerpo deben optimizarse para el tipo de tejido y el método de fijación que se esté estudiando.
• Como anticuerpo policlonal, debe tenerse en cuenta la posible variabilidad entre lotes; cada nuevo lote puede requerir una nueva optimización de las condiciones del ensayo.

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