Anticuerpo Monoclonal Anti-GCLC para WB, IF/ICC, ELISA - P48506

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de GCLC

• GCLC, también conocida como cadena pesada de GCS, gamma-ECS o sintetasa gamma-glutamilcisteína, es la subunidad catalítica de la ligasa glutamato-cisteína (GCL).
• Cataliza la ligación dependiente de ATP de L-glutamato y L-cisteína, el primer paso limitante de la velocidad en la biosíntesis de glutatión (GSH), una ruta antioxidante crítica.
• Junto con la subunidad reguladora GCLM, GCLC forma la holoenzima GCL heterodimérica, esencial para mantener la homeostasis redox celular.
• Las palabras clave indican que GCLC está sujeta a acetilación y fosforilación, lo que sugiere una regulación por modificaciones postraduccionales.
• Las mutaciones en GCLC están asociadas a anemia hemolítica hereditaria por deficiencia de glutatión, lo que pone de relieve su relevancia clínica.
• GCLC contiene un dominio de unión a ATP, coherente con su función de ligasa que utiliza ATP para la síntesis de glutatión.
• Es miembro del proteoma de referencia y ha sido identificado en múltiples estudios de proteómica, lo que confirma su expresión ubicua.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre la región N-terminal (aminoácidos 1-135) de la GCLC humana, una región que puede estar conservada entre especies, lo que coincide con la reactividad cruzada observada con el ratón.
• Para transferencia de Western (WB), considere optimizar la dilución del anticuerpo primario y realice la validación con lisados de control positivo y negativo que expresen GCLC.
• En inmunofluorescencia / inmunocitoquímica (IF/ICC), asegúrese de utilizar métodos adecuados de fijación y permeabilización para su tipo celular; se recomienda incluir controles de isotipo.
• Para ELISA, realice pruebas contra GCLC recombinante o proteína nativa en lisados de células/tejidos; una titulación en tablero de ajedrez puede ayudar a determinar las concentraciones óptimas de anticuerpo y antígeno.
• Dada la reactividad cruzada con ratón, este anticuerpo puede ser adecuado para estudios traslacionales en modelos de roedores; se recomienda la validación en la especie correspondiente.
• Incluya siempre controles adecuados (por ejemplo, muestras knockout o silenciamiento por siARN) para confirmar la especificidad en su sistema experimental.

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