Anticuerpo policlonal de conejo anti-GIF para WB y ELISA - P27352

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de GIF

• La proteína codificada por el gen CBLIF (GIF) es el factor intrínseco gástrico (IF), también conocido como factor intrínseco de unión a cobalamina, esencial para la absorción de vitamina B12 (cobalamina).
• GIF es una glucoproteína secretada por las células de la mucosa gástrica, principalmente las células parietales, y se produce como un precursor con un péptido señal.
• Funcionalmente, GIF se une a la cobalamina libre en el estómago; después de la escisión proteolítica en el duodeno, el complejo estable GIF-cobalamina interactúa con el receptor cubilina (CUBN) en el íleon, facilitando la endocitosis mediada por receptores para la absorción de vitamina B12.
• El gen GIF experimenta un corte y empalme alternativo, generando múltiples isoformas; las variantes asociadas a enfermedades en CBLIF causan deficiencia del factor intrínseco (IFD), lo que provoca anemia perniciosa debido a una absorción deficiente de B12.
• GIF es una fosfoproteína con múltiples enlaces disulfuro esenciales para su estructura y función, y pertenece a un grupo de proteínas implicadas en el transporte de cobalto e iones.
• La expresión tisular es altamente específica de la mucosa gástrica, en consonancia con su función en la absorción gastrointestinal de vitaminas.
• Las palabras clave asociadas con esta proteína incluyen variante relacionada con enfermedades, glucoproteína, secretada, señal y transporte, lo que destaca su importancia clínica y funcional.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es una proteína recombinante que abarca los aminoácidos 19-417 de GIF humano, correspondiente a la proteína madura sin el péptido señal, lo que sugiere que el anticuerpo puede reconocer la forma endógena secretada.
• Para el Western blot, considere comparar condiciones de SDS-PAGE reductoras y no reductoras, ya que GIF contiene múltiples enlaces disulfuro que pueden influir en la movilidad electroforética.
• Dada la expresión específica en la mucosa gástrica, valide el anticuerpo en lisados de estómago humano, de ratón o de rata, y considere utilizar un tejido negativo, como el hígado, para el control de especificidad.
• En ELISA, este anticuerpo policlonal puede evaluarse como reactivo de captura o de detección; para un ELISA tipo sándwich, se recomienda combinarlo con un anticuerpo monoclonal anti-GIF para mejorar la especificidad.
• Dado que GIF es una proteína secretada, al analizar sobrenadantes de cultivos celulares o tisulares pueden ser necesarios pasos de concentración para detectar los niveles endógenos mediante WB o ELISA.
• Debido a que se ha informado reactividad cruzada en ratón y rata, verifique la conservación de los epítopos y el rendimiento del ensayo en estas especies utilizando controles positivos adecuados.

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