Anticuerpo policlonal de conejo anti-GJB1 para WB y ELISA - P08034

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de GJB1 / conexina-32

• GJB1 codifica la proteína beta-1 de las uniones gap, también conocida como conexina-32 (Cx32) o proteína hepática de 28 kDa de las uniones gap, un miembro de la familia de conexinas de las proteínas de las uniones gap.
• La conexina-32 forma hemicanales hexaméricos (conexones) que se acoplan entre células adyacentes para crear uniones gap, permitiendo la difusión intercelular directa de iones y moléculas pequeñas < 1 kDa.
• Se localiza principalmente en la membrana celular y se encuentra enriquecida en las placas de las uniones gap, facilitando el acoplamiento eléctrico y metabólico en tejidos como el hígado, los nervios periféricos y las células de Schwann.
• La proteína tiene cuatro dominios transmembrana, con los extremos N y C ubicados intracelularmente; el inmunógeno corresponde al dominio citoplasmático C-terminal (residuos 214–283).
• GJB1 es una fosfoproteína; la fosforilación postraduccional regula la apertura de los canales, su ensamblaje y degradación.
• Las mutaciones en GJB1 están asociadas con la enfermedad de Charcot-Marie-Tooth ligada al cromosoma X (CMTX1) y el síndrome de Dejerine-Sottas, neuropatías periféricas hereditarias caracterizadas por debilidad muscular progresiva y pérdida sensorial.
• El peso molecular previsto es de aproximadamente 32 kDa, en consonancia con la banda de 32 kDa observada habitualmente en Western blot en condiciones reductoras.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aa 214–283) de GJB1 humano, que se predice como intracelular; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer tanto la proteína total como la no modificada, pero se recomienda realizar una confirmación.
• Para Western blot, considere utilizar muestras reducidas y validar el anticuerpo en tejidos que expresen GJB1 (por ejemplo, hígado y nervio ciático) o en líneas celulares; se espera una banda cercana a 32 kDa.
• Dado que el anticuerpo presenta reactividad cruzada con ratón y rata, es adecuado para estudios multiespecie; sin embargo, verifique la reactividad cruzada en su modelo experimental específico.
• Para ELISA, utilice proteína GJB1 recombinante o purificada como estándar; optimice empíricamente el tampón de recubrimiento y la dilución del anticuerpo, ya que no se proporciona un título predefinido.
• Este anticuerpo policlonal puede presentar variaciones entre lotes, características de las preparaciones policlonales; recomendamos incluir controles adecuados y considerar una validación específica para cada lote.

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