Anticuerpo monoclonal anti-isomerasa de glucosa-6-fosfato (GPI) [validado mediante KD] para WB, IF/ICC, ELISA - P06744

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la isomerasa de glucosa-6-fosfato

• La isomerasa de glucosa-6-fosfato (GPI) también se conoce como factor de motilidad autocrina (AMF), neuroleucina (NLK), fosfoglucosa isomerasa (PGI), fosfohexosa isomerasa (PHI) y antígeno espermático 36 (SA-36).
• La enzima cataliza la conversión de alfa-D-glucosa-6-fosfato en beta-D-fructosa-6-fosfato, el segundo paso de la glucólisis, y la reacción inversa en la gluconeogénesis, dentro del citoplasma. Referencias relacionadas: PMID:28803808
• La GPI también presenta actividad de C2-epimerasa, interconvirtiendo D-glucosa-6-fosfato y D-manosa-6-fosfato, así como actividad de anomerasa para múltiples hexosas-6-fosfato.
• Además de su función metabólica, la GPI extracelular actúa como citocina: como factor de motilidad autocrina (AMF), es un factor angiogénico secretado que aumenta la motilidad de las células endoteliales. Referencias relacionadas: PMID:11437381
• También actúa como neuroleucina, un factor neurotrófico que favorece la supervivencia de las neuronas espinales y sensoriales, y es liberada por células T estimuladas con lectina para inducir la secreción de inmunoglobulinas. Referencias relacionadas: PMID:11004567 PMID:3352745
• A nivel subcelular, la GPI se encuentra en el citoplasma y es secretada.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, hidroxilación, fosforilación y conjugación con ubiquitina; el corte y empalme alternativo produce múltiples isoformas.
• Las mutaciones en GPI están asociadas con anemia hemolítica hereditaria.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se generó utilizando un inmunógeno recombinante que abarca los aminoácidos 1-280 de la GPI humana (NP_000166.2), que puede dirigirse a epítopos conservados; se ha confirmado la reactividad cruzada con ratón y rata.
• Para la transferencia Western (WB), se espera una banda de aproximadamente 63 kDa; considere utilizar condiciones reductoras y controles positivos adecuados, como lisados celulares humanos, de ratón o de rata.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), tenga en cuenta que la GPI es citoplasmática y secretada; puede ser necesaria la fijación y permeabilización para la detección intracelular, y considere la tinción conjunta con marcadores de orgánulos.
• Para ELISA, el anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o de detección; valide con proteína GPI recombinante o muestras biológicas para establecer la linealidad y la sensibilidad.
• Como anticuerpo monoclonal, se espera una consistencia entre lotes, pero siempre deben optimizarse las diluciones de trabajo para el ensayo y tipo de muestra específicos.
• El anticuerpo está etiquetado como validado mediante KD; considere incorporar controles de silenciamiento génico adecuados en sus experimentos para confirmar la especificidad.

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