Anticuerpo Policlonico Anti-GNRH1 para WB, IF/ICC, ELISA - P01148

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de GNRH1

• La progonadoliberina-1 (GNRH1) es una proteína precursora que se procesa para producir la hormona liberadora de gonadotropinas 1 (GnRH), un regulador clave del eje reproductivo.
• GnRH estimula a la hipófisis anterior para secretar hormona luteinizante (LH) y hormona foliculoestimulante (FSH), que son esenciales para la función gonadal.
• La proteína está codificada por el gen GNRH1, también conocido como GNRH, GRH y LHRH, ubicado en el cromosoma 8.
• Se sintetiza como una preproproteína con un péptido señal (aa 1-23), y el decapéptido maduro (aa 24-33) se libera después de la escisión proteolítica.
• Subcelularmente, GNRH1 se dirige a la vía secretora y es secretado por las neuronas hipotalámicas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la amidación del extremo C, la formación de ácido piroglutámico en el extremo N y la escisión en residuos básicos pareados.
• El peso molecular del precursor no procesado es de aproximadamente 10,38 kDa, pero el procesamiento genera péptidos activos más pequeños.
• Las mutaciones en GNRH1 están asociadas con hipogonadismo hipogonadotrópico y síndrome de Kallmann, lo que resalta su importancia clínica.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado corresponde a los aminoácidos 24–92, que incluye el decapéptido GnRH maduro y las secuencias flanqueantes; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer tanto las formas precursora como procesadas.
• Para Western blot, el peso molecular predicho del precursor de longitud completa es de ~10 kDa; utilice un gel de alto porcentaje (por ejemplo, 15%) y optimice las condiciones de transferencia para retener los péptidos pequeños.
• La detección del péptido maduro secretado en WB puede requerir la concentración del sobrenadante de cultivo o protocolos de extracción de péptidos.
• En IF/ICC, GNRH1 es secretado; considere el uso de inhibidores del aparato de Golgi (por ejemplo, brefeldina A) para visualizar la acumulación intracelular en células neuroendocrinas.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de captura o detección; valide su rendimiento con estándares de GnRH recombinante.
• La reactividad cruzada con ratón y rata sugiere epítopos conservados; sin embargo, verifique siempre la especificidad en la especie y tipo de tejido correspondiente.

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