Anticuerpo policlonal de conejo anti-GNRHR para WB, ELISA - P30968

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del GNRHR

• El GNRHR es el receptor de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH), un regulador clave de la función reproductiva. Entre sus nombres alternativos se incluyen HH7, GRHR, LRHR, LHRHR y GNRHR1.
• Tras la unión de la GnRH, el GNRHR media la señalización acoplada a proteínas G y activa un sistema de segundos mensajeros de fosfatidilinositol-calcio para estimular la secreción de la hormona luteinizante (LH) y la hormona foliculoestimulante (FSH).
• El receptor pertenece a la familia de receptores acoplados a proteínas G (GPCR), presenta siete dominios transmembrana y está sujeto a corte y empalme alternativo, lo que produce la isoforma 2, que puede inhibir la señalización de GnRH-R.
• El GNRHR se localiza principalmente en la membrana celular, en consonancia con su función como receptor transmembrana.
• Su expresión tisular incluye la hipófisis, así como el ovario, los testículos, la mama y la próstata, pero está ausente en el hígado y el bazo, lo que pone de relieve su función específica en los tejidos reproductivos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glucosilación y la formación de enlaces disulfuro, importantes para la estructura y función del receptor; las mutaciones en GNRHR están asociadas con hipogonadismo hipogonadotrópico.
• La proteína de longitud completa tiene un peso molecular previsto de aproximadamente 37,7 kDa (UniProt), mientras que el inmunógeno del producto corresponde a los aminoácidos 1-80 del extremo N-terminal.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo policlonal se generó contra una región N-terminal (aa 1-80) del GNRHR humano; considere utilizarlo para detectar tanto el receptor maduro como potencialmente la isoforma 2, aunque se recomienda realizar una validación.
• Para Western blot (WB), el tamaño esperado de la banda es de aproximadamente 38 kDa; valide este dato en su tipo específico de muestra, ya que la glucosilación puede provocar un desplazamiento.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir una optimización cuidadosa de las condiciones de recubrimiento y detección; si se cuantifican fragmentos solubles del receptor, considere combinarlo con un anticuerpo monoclonal de captura para un ELISA tipo sándwich.
• Se ha informado reactividad cruzada con ratón y rata; sin embargo, debe verificarse la homología de secuencia en la región del inmunógeno si se necesita una discriminación precisa entre especies.
• Debido a la naturaleza de proteína de membrana, al preparar muestras para WB deben incluirse pasos adecuados de preparación de membranas y solubilización en los tampones de lisis para garantizar una extracción eficaz.

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