Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-GOT2 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P00505

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de GOT2

• GOT2, también conocida como aspartato aminotransferasa mitocondrial, quinurenina aminotransferasa 4 (KAT4) o proteína de unión a ácidos grasos asociada a la membrana plasmática (FABPpm), está codificada por el gen GOT2 en humanos. Pertenece a la familia de aminotransferasas dependientes de piridoxal-fosfasa de clase I.
• Como enzima clave del lanzadera malato-aspartato, GOT2 es esencial para mantener el equilibrio redox intracelular de NAD(H) al facilitar la transferencia de equivalentes de reducción a través de la membrana mitocondrial.
• GOT2 cataliza la transaminación irreversible de L-quinurenina a ácido quinurénico (KA), un metabolito neuroactivo, vinculándolo con la modulación de la vía de la quinurenina y los procesos neurológicos.
• La enzima también desempeña un papel en la captación celular de ácidos grasos de cadena larga a través de su identidad como FABPpm en la membrana plasmática, contribuyendo al transporte de lípidos.
• GOT2 se localiza principalmente en la matriz mitocondrial; sin embargo, también se detecta una fracción en la membrana celular, lo que es consistente con sus funciones duales en el metabolismo mitocondrial y la captación de ácidos grasos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, metilación, nitración y fosforilación, que pueden regular su actividad y distribución subcelular. La proteína se sintetiza con un péptido de tránsito mitocondrial que se escinde para dar lugar a la forma madura.
• Las mutaciones en GOT2 se asocian con la encefalopatía epiléptica y del desarrollo 82 (DEE82), lo que subraya su papel crítico en el metabolismo cerebral.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los residuos 30-200 del GOT2 humano, una región que incluye el segmento N-terminal de la proteína mitocondrial madura después de la escisión del péptido de tránsito. Este diseño puede favorecer el reconocimiento de la forma endógena procesada en las mitocondrias.
• Para aplicaciones de Western blot, considere enriquecer las fracciones mitocondriales para mejorar la relación señal-ruido, ya que GOT2 es predominantemente mitocondrial. El peso molecular predicho del precursor es de ~47,5 kDa, mientras que la proteína madura migra cerca de 48 kDa.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), valide la detección en tejidos o células con alta actividad metabólica (por ejemplo, hígado, corazón, cerebro) donde la expresión de GOT2 es abundante. Optimice los pasos de permeabilización y recuperación de antígenos para garantizar el acceso a los epítopos mitocondriales.
• Para ELISA, use GOT2 recombinante o lisados tisulares como estándar para establecer la sensibilidad y especificidad del ensayo. Se ha observado reactividad cruzada con GOT2 de ratón y rata, lo que lo hace adecuado para modelos traslacionales.

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