Anticuerpo Policlonal Anti-GRASP65 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9BQQ3

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de GRASP65 (GORASP1)

• GRASP65 (GORASP1, GOLPH5) es una proteína estructural clave del aparato de Golgi, perteneciente a la familia GORASP. El splicing alternativo produce múltiples isoformas. (Palabras clave: Splicing alternativo)
• Es necesario para la formación y el mantenimiento de la cinta del Golgi, actuando en conjunto con GORASP2/GRASP55. También desempeña un papel en el ensamblaje y el apilamiento de membranas de los cisternas, y en el reensamblaje de las pilas del Golgi después de la descomposición mitótica.
  Referencias relacionadas:
  PMID:33301566
• La escisión mediada por caspasas de GRASP65 es necesaria para la fragmentación del Golgi durante la apoptosis. (Por similitud)
• GRASP65 media, a través de la interacción con GOLGA2/GM130, el acoplamiento de las vesículas de transporte con las membranas del Golgi.
  Referencias relacionadas:
  PMID:16489344
• Facilita el tráfico no convencional inducido por estrés en el retículo endoplasmático del CFTR glicosilado básico hacia la membrana celular.
  Referencias relacionadas:
  PMID:21884936
• A nivel subcelular, GRASP65 se localiza en el aparato de Golgi, específicamente en la membrana de la red cis del Golgi y en la membrana del compartimento intermedio entre el retículo endoplasmático y el Golgi.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, miristoilación y unión a zinc. La proteína es una fosfoproteína, lipoproteína y proteína de unión a metales.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 221–440 del GRASP65 humano, situado en la región C-terminal. Al predecir el reconocimiento de isoformas, considere las variantes de splicing potenciales que afecten a este dominio.
• Para la transferencia Western (Western blotting, WB), valide el anticuerpo en líneas celulares humanas; el GRASP65 endógeno migra aproximadamente a 46 kDa. Durante la apoptosis pueden aparecer fragmentos de escisión: use controles apropiados (p. ej., células tratadas con estaurosporina).
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), optimice la fijación (p. ej., metanol o paraformaldehído) y la permeabilización para lograr una tinción clara del Golgi. Se recomienda la tinción simultánea con un marcador del Golgi (p. ej., GM130).
• Para ELISA, el anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o detección; titule para determinar la concentración óptima para su sistema de ensayo.

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