Anticuerpo policlonal anti-GRHL2 para WB y ELISA - Q6ISB3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de GRHL2

• GRHL2 (homólogo 2 de la proteína similar a Grainyhead), también conocido como Brother of mammalian grainyhead (BOM) o factor de transcripción CP2-like 3, es un factor de transcripción que se une a la secuencia consenso de ADN 5'-AACCGGTT-3' y actúa como activador y represor de genes diana (por similitud).
• Desempeña un papel esencial en la neurulación primaria y el desarrollo epitelial; coopera con GRHL3 en el establecimiento de zonas de cierre diferenciadas y es esencial para el cierre del prosencéfalo rostral (PubMed:25152456, PubMed:29309642).
  Referencias relacionadas: PMID:25152456 PMID:29309642
• Como regulador maestro de la morfogénesis epitelial, GRHL2 aumenta la expresión de componentes de las uniones estrechas (CLDN3, CLDN4) y RAB25, mejorando la localización de CLDN4; también establece niveles adecuados de expresión de CDH1 en diversos epitelios (por similitud).
• Presenta redundancia funcional con GRHL3 en la morfogénesis epidérmica y la reparación de heridas; en el pulmón, forma un circuito regulador con NKX2-1 para coordinar la diferenciación de las células epiteliales (por similitud).
• En los queratinocitos, GRHL2 activa la telomerasa al unirse al promotor de TERT e inhibir la metilación del ADN en su isla CpG 5', posiblemente interfiriendo con la actividad de DNMT1 (PubMed:19015635, PubMed:20938050).
  Referencias relacionadas: PMID:19015635 PMID:20938050
• Por el contrario, perjudica la diferenciación de los queratinocitos al reprimir epigenéticamente genes del complejo de diferenciación epidérmica (EDC), así como GRHL1 y GRHL3 (PubMed:23254293).
  Referencias relacionadas: PMID:23254293
• A nivel subcelular, GRHL2 se localiza en el núcleo y la membrana, en consonancia con sus funciones en la transcripción y la regulación de las uniones celulares.
• Se expresa en altos niveles en la placenta, la próstata, el cerebro, el riñón y numerosos tejidos epiteliales; también se detecta en la cóclea y en las células epiteliales corneales (PubMed:29499165). Las mutaciones en GRHL2 están asociadas con la distrofia corneal (PPCD4), la sordera no sindrómica (DFNA28) y la displasia ectodérmica.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno de este anticuerpo corresponde a los aminoácidos 80–250 de GRHL2 humano (NP_079191.2), una región que abarca parte del dominio N-terminal. Esta secuencia está conservada en la rata (reactividad cruzada confirmada), pero los investigadores deben verificar la reactividad en otras especies mediante alineamiento de secuencias.
• Para el Western blot (WB), el peso molecular previsto de GRHL2 es de aproximadamente 71 kDa; sin embargo, las modificaciones postraduccionales o las variaciones de isoformas pueden dar lugar a bandas adicionales. Optimice los controles de carga y las condiciones de bloqueo.
• En ELISA, considere utilizar una curva estándar de péptido o proteína recombinante para la cuantificación. Debido a su naturaleza policlonal, debe validarse la consistencia entre lotes para obtener resultados reproducibles.
• Al detectar GRHL2 endógeno en células o tejidos epiteliales (por ejemplo, piel, pulmón o riñón), los protocolos de extracción nuclear pueden enriquecer la señal. Valide la especificidad mediante silenciamiento por siRNA o pruebas paralelas con líneas celulares negativas conocidas.

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