Anticuerpo policlonal anti-GRK5 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P34947

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de GRK5

• Codificada por el gen GRK5 (también conocido como GPRK5), GRK5 es un miembro de la familia de quinasas de receptores acoplados a proteína G (GRK) que fosforila específicamente los GPCR activados, iniciando la desensibilización e internalización mediante el reclutamiento de beta-arrestina.
• Más allá de los GPCR, GRK5 fosforila múltiples sustratos no receptores, incluyendo ST13 (que regula el tráfico de receptores de quimiocinas), TP53/p53 (que inhibe la apoptosis), HDAC5 (que promueve la exportación nuclear y mejora la transcripción mediada por MEF2), ARRB1 e incluso LRP6 en la señalización Wnt.
• A nivel subcelular, GRK5 se localiza dinámicamente en el citoplasma, el núcleo y la membrana celular, lo que es consistente con sus funciones en la regulación de receptores de membrana plasmática y la modulación transcripcional nuclear.
• La distribución tisular es amplia pero enriquecida: los niveles más altos se detectan en el corazón, la placenta y los pulmones, con una expresión moderada en el músculo esquelético, el cerebro, el hígado, el páncreas y el riñón.
• La actividad quinasa es dependiente de ATP y la proteína contiene dominios de unión a lípidos, lo que permite su asociación con la membrana; también es una fosfoproteína sujeta a modificaciones reguladoras.
• Las palabras clave funcionales incluyen señalización de apoptosis, participación en la vía Wnt y actividad serina/treonina quinasa, lo que subraya sus funciones multifuncionales en la señalización celular y la enfermedad.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blotting, prepare lisados de células completas a partir de tejidos con alta expresión de GRK5 (por ejemplo, corazón, pulmón). Se espera una banda de aproximadamente 68 kDa en condiciones reductoras; valide con un lisado de control positivo.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), se puede emplear la recuperación de antígeno estándar (por ejemplo, tampón de citrato pH 6.0); incluya tejidos positivos conocidos, como el músculo cardíaco, y controles negativos para evaluar la especificidad.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), se pueden utilizar líneas celulares que expresen GRK5 de forma endógena. Las condiciones de fijación/permeabilización deben optimizarse, y los estudios de co-localización con marcadores de membrana o nucleares pueden confirmar la dinámica de localización.
• Como anticuerpo policlonal, se recomienda verificar la consistencia entre lotes para ensayos cuantitativos como ELISA. Utilice proteína GRK5 recombinante como estándar.

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