Anti-GSDMD (Longitud completa+N terminal) Anticuerpo Policlonal de Conejo para WB, IF/ICC, ELISA - P57764

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Gasdermin-D

• Gasdermin-D (GSDMD) es un miembro de la familia gasdermina, denominado alternativamente proteína que contiene el dominio gasdermina 1, codificado por el gen GSDMD (también conocido como DFNA5L, GSDMDC1, FKSG10). Funciona principalmente como el precursor de una proteína formadora de poros esencial para la piroptosis y la defensa del huésped contra patógenos.
• Tras la activación canónica o no canónica del inflamasoma, las caspasas inflamatorias (CASP1, CASP4, CASP5) escinden GSDMD, liberando el fragmento formador de poros N-terminal de la autoinhibición.
  Referencias relacionadas: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27418190
• El fragmento N‑terminal liberado se transloca a la membrana plasmática, uniéndose fuertemente a fosfoinosítidos (p. ej., PI4P, PI(4,5)P2), ácido fosfatídico y fosfatidilserina, pero no a fosfolípidos sin carga, donde se oligomeriza en poros de 10–15 nm.
  Referencias relacionadas: PMID:27281216 PMID:29898893 PMID:36227980
• Estos poros median la liberación de IL‑1β e IL‑18 maduras, citocinas críticas para la respuesta inflamatoria, y también pueden liberar caspasa‑7 madura y ADN mitocondrial (ADNmt).
  Referencias relacionadas: PMID:27281216 PMID:27418190 PMID:29898893
• En algunos tipos de células, la muerte celular piroptótica se produce mediante la activación descendente de ninjurina‑1 (NINJ1), lo que conduce a la ruptura de la membrana plasmática.
  Referencias relacionadas: PMID:33472215 PMID:37198476
• Más allá de su papel lítico, los fragmentos N‑terminales de GSDMD pueden matar directamente bacterias extracelulares Gram‑negativas y Gram‑positivas, y en condiciones de cultivo celular, restringir patógenos intracelulares como Listeria monocytogenes.
  Referencias relacionadas: PMID:27281216
• En el intestino delgado, el escisión por CASP3 o CASP7 produce un coactivador de transcripción que se transloca al núcleo, asociándose con STAT1 para inducir la expresión de CIITA y MHC de clase II, manteniendo así la tolerancia a los alimentos. (Por similitud)
• El escisión por el alérgeno papaína también genera el fragmento formador de poros N‑terminal, que libera específicamente IL‑33 madura, promoviendo la inmunidad de tipo 2.
  Referencias relacionadas: PMID:35794369
• GSDMD se expresa ampliamente, con una presencia notable en las células suprabasales del esófago y el istmo/cuello, fosa y glándula gástricos, y se localiza en el citoplasma, inflamasoma, membrana plasmática, mitocondrias y núcleo bajo diversas condiciones.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para la transferencia Western (Western blotting), el anticuerpo reconoce un epítopo dentro de los aminoácidos 154–252 del dominio N‑terminal; por lo tanto, tanto la GSDMD de longitud completa (predicha ~53 kDa) como el fragmento N‑terminal escindido (~31–34 kDa) pueden detectarse. Valide en el sistema de muestra relevante y considere el uso de lisados celulares activados por inflamasoma para observar los productos de escisión.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, GSDMD puede localizarse en el citoplasma, la membrana plasmática y el núcleo dependiendo del estado de activación. Se recomienda la optimización de las condiciones de permeabilización y fijación. Incluya los controles apropiados para confirmar la especificidad.
• Para ELISA, la naturaleza policlonal permite un uso potencial tanto como anticuerpos de captura como de detección en formatos de ELISA sándwich. El emparejamiento con un anticuerpo monoclonal específico para un epítopo distinto puede mejorar la sensibilidad. Se aconseja una curva estándar utilizando proteína recombinante.

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