Anticuerpo Monoclonal Anti-GSK-3α/β para WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P49840/P49841

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de GSK-3α/β

• GSK-3α y GSK-3β son serina/treonina quinasas constitutivamente activas que fosforilan e inactivan la glucógeno sintasa (GYS1/GYS2), regulando negativamente la síntesis de glucógeno y la homeostasis de la glucosa.
  Referencias relacionadas: PMID:11749387, PMID:17478001, PMID:19366350
• Desempeñan un papel fundamental en la vía de señalización Wnt/β-catenina al fosforilar β-catenina (CTNNB1), promoviendo su ubiquitinación y degradación proteasómica, lo que inhibe la transcripción de genes diana de Wnt.
  Referencias relacionadas: PMID:17229088
• GSK-3α contribuye a la patogénesis de la enfermedad de Alzheimer al facilitar el procesamiento de la proteína precursora de amiloide (APP) y la generación de placas de amiloide neurotóxicas.
  Referencias relacionadas: PMID:12761548
• Estas quinasas participan en la señalización de la insulina: pueden mediar el desarrollo de resistencia a la insulina mediante la regulación de factores de transcripción que controlan genes metabólicos.
  Referencias relacionadas: PMID:10868943, PMID:17478001
• GSK-3α regula la autofagia fosforilando la acetiltransferasa KAT5/TIP60 en condiciones de inanición, lo que a su vez acetila y activa proteínas clave de la autofagia como ULK1 y RUBCNL.
  Referencias relacionadas: PMID:30704899
• Ambas isoformas presentan un dominio quinasa N-terminal con sitios de unión a ATP y nucleótidos, y su actividad se modula mediante quinasas aguas arriba a través de la fosforilación en residuos de serina N‑terminal específicos (Ser21 para GSK-3α, Ser9 para GSK-3β). Su disregulación se relaciona con la diabetes, la neurodegeneración y el cáncer.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blotting, espere bandas a aproximadamente 46 kDa (GSK-3α) y 48 kDa (GSK-3β) en lisados celulares o tisulares de humano, ratón o rata. Utilice SDS-PAGE estándar y membranas de nitrocelulosa/PVDF.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC) e inmunohistoquímica (IHC), permeabilice las células o desparafine y realice la recuperación de antígenos en los tejidos de manera adecuada, ya que GSK-3α/β se localizan predominantemente en el citoplasma pero también pueden encontrarse en el núcleo. Valide la especificidad de la señal con controles positivos y negativos conocidos.
• Para ELISA, considere un formato sándwich utilizando este anticuerpo de captura emparejado con un anticuerpo de detección que reconozca un epítopo diferente. Titule las concentraciones de anticuerpo para optimizar la relación señal/ruido.
• El inmunógeno de proteína recombinante sugiere que el anticuerpo puede reconocer tanto las formas fosforiladas como las no fosforiladas. Verifique el reconocimiento del estado de modificación deseado tratando las muestras con moduladores (p. ej., insulina o Wnt3a para inducir la fosforilación, o inhibidores de fosfatasas para preservar los estados endógenos).
• Se ha informado reactividad cruzada con ortólogos de ratón y rata; sin embargo, confirme siempre la reactividad en su sistema modelo específico, ya que los niveles de expresión y las modificaciones postraduccionales pueden variar.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

CamelBio actúa como socio de abastecimiento integral para desarrolladores de diagnósticos y laboratorios de investigación, ofreciendo pares de anticuerpos validados, anticuerpos monoclonales y policlonales optimizados, y reactivos auxiliares a granel. Con un enfoque en objetivos metabólicos y de transducción de señales como GSK-3α/β, agilizamos la adquisición de materias primas de IVD de alta calidad para acelerar el desarrollo de sus ensayos desde el concepto hasta la clínica.