Anticuerpo monoclonal Anti-GSK3β para citometría de flujo (intracelular) - P49841

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de GSK3β

• GSK3β es una quinasa serina/treonina constitutivamente activa que actúa como regulador negativo en el control hormonal de la homeostasis de la glucosa, la señalización Wnt y la regulación de factores de transcripción y microtúbulos, al fosforilar sustratos como la glucógeno sintasa, la β-catenina y la Tau. Referencias relacionadas: PMID:11430833 PMID:12554650 PMID:14690523
• Requiere la fosforilación previa de la mayoría de los sustratos; en el músculo esquelético, fosforila e inhibe la glucógeno sintasa (GYS1), regulando la síntesis de glucógeno y contribuyendo potencialmente a la resistencia a la insulina. Referencias relacionadas: PMID:8397507 PMID:11430833 PMID:16484495
• En la señalización Wnt, GSK3β forma un complejo con APC, AXIN1 y β-catenina, fosforilando la β-catenina para promover su degradación mediada por ubiquitina. Referencias relacionadas: PMID:12554650
• GSK3β fosforila la Tau (MAPT) en Thr-548, reduciendo la unión a los microtúbulos; la Tau es un componente principal de los ovillos neurofibrilares en la enfermedad de Alzheimer, y GSK3β se colocaliza con la Tau y PKR en cerebros con Alzheimer. Referencias relacionadas: PMID:14690523
• Regula el reloj circadiano al fosforilar las proteínas centrales del reloj BMAL1, CLOCK y PER2, marcándolas para degradación proteosomal. Referencias relacionadas: PMID:19946213 PMID:28903391
• GSK3β se localiza en el citoplasma, núcleo y membrana celular; se expresa altamente en testículo, timo, próstata, ovario y débilmente en pulmón, cerebro, riñón. El gen sufre empalme alternativo, y la proteína se modifica por fosforilación, ADP-ribosilación y palmitoilación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se dirige a un epítopo intracelular; se requiere fijación y permeabilización para la citometría de flujo intracelular. Optimice las condiciones de permeabilización para su tipo celular.
• Valide la expresión de GSK3β en líneas celulares relevantes (p. ej., HEK293, HeLa) utilizando controles positivos y negativos para confirmar la especificidad de la tinción.
• Utilice controles de isotipo apropiados y valore el anticuerpo conjugado para minimizar el fondo y optimizar la relación señal/ruido.
• Dado que el inmunógeno abarca los aminoácidos 321-420 cerca del extremo C-terminal, asegúrese de que la accesibilidad del epítopo no esté enmascarada por interacciones o modificaciones proteicas.
• Verifique la configuración de compensación si utiliza en paneles multicolor; consulte las guías de superposición espectral del colorante de referencia.
• No se proporcionan datos de reactividad cruzada; verifique la compatibilidad con su especie objetivo o línea celular de interés.

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