Anticuerpo Policlonal Anti-GUCY2D para WB y ELISA - Q02846

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de GUCY2D

• GUCY2D, también conocida como guanilil ciclasa retiniana 1 (ROS-GC, GC-E), es una enzima unida a membrana codificada por el gen GUCY2D en humanos. Sus múltiples alias asociados a enfermedades incluyen LCA1, CORD6 y CSNB1I.
• GUCY2D cataliza la conversión de GTP a cGMP, un segundo mensajero clave en las células fotorreceptoras, reponiendo los niveles de cGMP que se agotan durante la fototransducción en bastones y conos. Esta actividad es crítica para la transducción de señales visuales (PubMed:15123990, PubMed:21928830, PubMed:26100624). Referencias relacionadas: PMID:15123990 PMID:21928830 PMID:26100624
• Las evidencias sugieren que GUCY2D también puede estar involucrada en el tráfico de proteínas asociadas a la membrana hacia la membrana del segmento externo del fotorreceptor (Por similitud).
• La proteína se localiza principalmente en la membrana del segmento externo del fotorreceptor y en la membrana del retículo endoplásmico, lo cual es consistente con su papel en la transducción sensorial y el procesamiento de proteínas.
• GUCY2D es una glicoproteína que contiene múltiples hélices transmembranales, un enlace disulfuro y un péptido señal, característicos de su integración en la membrana y procesamiento en la vía secretora.
• Las mutaciones en GUCY2D se asocian con varias distrofias retinianas hereditarias, incluyendo la amaurosis congénita de Leber (LCA1), la distrofia cono-bastón (CORD6) y la ceguera nocturna congénita estacionaria, lo que subraya su papel esencial en la visión.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Diseño del inmunógeno: El inmunógeno de proteína de fusión recombinante corresponde a la región N-terminal (aa 52-350) del GUCY2D humano, que podría dirigirse al dominio extracelular/luminal. Este diseño racional asegura la especificidad del anticuerpo evitando las regiones transmembranales altamente hidrofóbicas.
• Western blot (WB): Se espera una banda alrededor de 120 kDa basándose en el peso molecular calculado de ~120 kDa. Debido a la glicosilación y otras modificaciones, la migración real puede variar. Use los controles adecuados y valide en muestras de retina o derivadas de fotorreceptores.
• ELISA: El anticuerpo es adecuado para ELISA. Considere el formato de ELISA indirecto y valide usando proteína recombinante o lisados celulares que expresen GUCY2D. La reactividad cruzada con ortólogos de ratón y rata puede ser ventajosa para estudios de traslación.
• Preparación de la muestra: Para proteínas de membrana como GUCY2D, asegure una solubilización adecuada con detergentes apropiados y evite hervir las muestras para prevenir la agregación. Optimice las condiciones desnaturalizantes para su configuración experimental específica.

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