Anticuerpo policlonal de conejo Anti-GZMA para WB, IF/ICC, ELISA - P12544

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Granzima A

• La granzima A, también conocida como triptasa CTL, fragmentina-1, factor Hanukkah (HF), codificada por el gen GZMA (CTLA3, HFSP), es una serina proteasa abundante que se encuentra en los gránulos citoplasmáticos de las células T citotóxicas y las células asesinas naturales (NK).
• Induce piroptosis independiente de caspasas en células diana después de ser liberada a través de la sinapsis inmunológica, realizando la escisión después de residuos de Lis o Arg. Referencias relacionadas: PMID:12819770, PMID:32299851, PMID:3257574
• Una vez dentro de la célula diana, GZMA escinde la gasdermina B (GSDMB), liberando su dominio formador de poros para desencadenar la piroptosis y la muerte celular. Referencias relacionadas: PMID:32299851, PMID:34022140, PMID:36157507
• También escinde APEX1 después de Lys-31, destruyendo su actividad de reparación oxidativa. Referencias relacionadas: PMID:12524539
• GZMA escinde la proteína de ensamblaje de nucleosomas SET después de Lys-189, alterando el ensamblaje de nucleosomas y permitiendo que el complejo SET migre al núcleo para cortar y degradar el ADN. Referencias relacionadas: PMID:11555662, PMID:12628186, PMID:16818237
• Subcelularmente, la granzima A se localiza en los gránulos citoplasmáticos y se secreta durante la desgranulación.
• Como glicoproteína con enlaces disulfuro, se produce inicialmente como zimógeno y es una serina proteasa bien caracterizada con estructuras 3D disponibles.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blotting, se espera una banda de aproximadamente 29 kDa; valide la detección usando lisados de control positivo de células T citotóxicas activadas o líneas celulares NK.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, se requiere permeabilización para detectar GZMA citoplasmática granular. La co-tinción con perforina o CD8 puede confirmar la especificidad de las células citotóxicas.
• Al realizar ELISA, considere usar GZMA humana recombinante como estándar y verifique la linealidad en la matriz de muestra correspondiente.
• Este anticuerpo muestra reactividad cruzada con GZMA de ratón y rata, pero se recomienda una alineación de secuencia de la región del inmunógeno si se necesitan comparaciones interespecíficas cuantitativas.

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